Zeitschrift für Lebensmittelverarbeitung und -technologie

Abstrakt

Selektive Entfernung von Phenylalaninverunreinigungen aus kommerziellem κ-Casein-Glycomakropeptid durch Anionenaustauschchromatographie

Nakano T und Ozimek L

Das in Süßmolke enthaltene bovine κ-Casein-Glycomakropeptid (GMP) ist ein phosphoryliertes Glykopeptid mit 64 Aminosäuren. Da ihm aromatische Aminosäuren wie Phenylalanin fehlen, gilt GMP als wichtige Nahrungsquelle für Aminosäuren für Patienten, die an Phenylketonurie leiden. Es liegen jedoch nur sehr wenige Informationen über die Herstellung von phenylalaninfreiem GMP für den menschlichen Verzehr vor. Diese Studie wurde daher durchgeführt, um phenylalaninhaltige Verunreinigungen aus handelsüblichem Roh-GMP durch Anionenaustauschchromatographie an Diethylaminoethyl (DEAE)-Sephacel zu entfernen. Die Ergebnisse zeigten, dass phenylalaninhaltige Proteine ​​oder Peptide nicht an die Säule binden, während der Großteil des GMP, das 93 % der insgesamt zurückgewonnenen Sialinsäure ausmacht, an die Säule binden kann. Das gereinigte GMP, das durchschnittlich 43 % des Trockengewichts des Roh-GMP ausmachte, enthielt nicht nachweisbare Mengen an Phenylalanin. Analysen und Celluloseacetat-Elektrophorese zeigten, dass das gereinigte GMP ein Produkt mit hohem Sialinsäuregehalt ist (durchschnittlich 15,5 % Trockengewicht). Gelfiltrationschromatographie auf Sephacryl S-100 und Größenausschluss-HPLC auf Superdex 75 bestätigten unsere früheren Erkenntnisse, dass GMP-Monomere Aggregate bilden und als einzelner Peak eluieren, dessen Elutionsvolumen nahe am Elutionsvolumen von dimerem β-Lactoglobulin (36,6 kDa) liegt. Wir kamen zu dem Schluss, dass das Rohpräparat von GMP durch selektive Entfernung von Phenylalaninverunreinigungen mittels DEAE-Sephacel-Chromatographie stark verfeinert werden kann.