Danilo A. Alves, Ives B. Mattos, Luciana M. Hollanda und Marcelo Lancellotti
Äußere Membranvesikel oder OMV sind Nanopartikel, die während des Wachstums von Meningokokken ins Kulturmedium freigesetzt werden. Sie entstehen durch Ausstülpungen der äußeren Zellmembran und gelten als potenzielles Ziel für die Impfstoffproduktion. Ziel dieser Studie war die Analyse der Verwendung von Neisseria meningitidis B2443 als Impfstoff unter Verwendung eines auf Ultrafiltration basierenden halbfesten Fermentationsprozesses zur Isolierung dieser OMV und die Überprüfung der Wirkung der mesoporen Kieselsäure (SBA-15 und SBA-16). Die OMV-Herstellung erfolgte nach der Methode ohne Ultrazentrifugation, die durch die Ultrafiltrationsmethode unter Verwendung eines Nitrozellulosefilters mit einer Porengröße von 0,025 μm ersetzt wurde. Zum Nachweis der Antikörperproduktion wurden die immunologische ELISA-Methode und die bakterizide Wirkung von Serum anhand von Seren von mit OMV und anorganischen Nanopartikeln als Adjuvans immunisierten Mäusen verwendet. Außerdem wurde ein Zytotoxizitätstest basierend auf der Neutralrot-Aufnahme durchgeführt, um die Sicherheit der Verwendung des zugehörigen Impfstoffs in der NIH-3T3-Zelllinie zu gewährleisten. Er wurde mit der OMV-Produktion der N. meningitidis-Stämme B2443 und C2135 verglichen. Die Ergebnisse zeigten, dass unterschiedliche N. meningitidis-Stämme eine OMV-Produktionskinetik unterschiedlicher Zeit und Menge aufweisen. Die Verwendung von SBA-15 und SBA-16 als Adjuvans in einer Dosis von 250 μg pro Maus war ausreichend, um eine Erhöhung der Impfstoffkapazität (für andere Serogruppen) zu bewirken, genauso wie bei Verwendung von nur aus dem Stamm B2443 extrahiertem OMV. Die Studie zeigte, dass die für die OMV-Herstellung verwendete Methodik im Hinblick auf Menge, Kosten und Verwendung dieses biologischen Nanopartikels vorteilhaft ist. Sowohl die in dieser Arbeit verwendeten mesoporösen Kieselsäuren SBa15 als auch SBa16 waren in der Lage, die Erkennung von Antikörpern gegen verschiedene Stämme von N. meningitidis zu erhöhen, wobei das aus einem einzigen Impfstoffstamm extrahierte OMV verwendet wurde.