Zeitschrift für Aquakulturforschung und -entwicklung

Abstrakt

Der Nitazoxanid-aktivierende Keap1a/Nrf2-Signalweg wird durch Cul3 von Criataria plicata reguliert

Wuting Lu, Feixiang Su, Fanhua Yang, Jinhua An, Baoqing Hu, Shaoqing Jian, Gang Yang*, Chungen Wen*

Cul3 reguliert unter normalen Bedingungen die Ubiquitinierung und den Abbau von Nrf2 im Nrf2/keap1a-Signalweg. Bei wirbellosen Wassertieren wurde der damit verbundene Mechanismus der Aktivierung von oxidativem Stress bei Muscheln durch Stimulation von Cristatra plicata mit Nitazoxanid (NTZ) untersucht. Das vollständige Cul3- Gen von C. plicata , bezeichnet als CpCul3, wurde geklont. Die vergleichende Sequenzanalyse des CpCul3- Gens und seiner homologen Gene zeigte, dass das CpCul3 -Gen in seiner Aminosäuresequenz große Ähnlichkeit mit den homologen Genen anderer Arten aufweist. Die Aminosäuresequenz von CpCul3 ähnelt zu 78–98 % der anderer Wirbelloser. Im phylogenetischen Baum ist das CpCul3 -Gen enger mit dem Cul3- Gen anderer Muscheln verwandt. Nach der NTZ-Stimulation erhöhte sich der Expressionsgrad der CpCul3- mRNA im Hepatopankreas von C. plicata . Der Proteinexpressionsgrad von CpCul3 wurde mithilfe eines CpCul3- spezifischen Antikörpers ermittelt und der Expressionsgrad stieg ebenfalls an. Die Ergebnisse der subzellulären Lokalisierung von CpCul3 in HEK293T zeigten, dass CpCul3 mit Mitochondrien, Lysosomen und dem endoplasmatischen Retikulum kolokalisieren könnte und die Kolokalisierung mit Mitochondrien deutlicher ist. Die Ergebnisse zeigten, dass CpCul3 eine wichtige Rolle bei der Regulierung von oxidativem Stress spielen könnte. Das CoIP-Experiment bewies, dass CpCul3 den Abbau von CpNrf2 durch Ubiquitinierung fördern könnte. Schließlich könnte CpNrf2 durch K48-vermittelte Ubiquitinierung abgebaut werden.