Zeitschrift für Stammzellforschung und -therapie

Abstrakt

Langfristige Existenz von aus Fettgewebe gewonnenen Stammzellen des Spenders im Empfänger kann das Überleben der Allotransplantation von vaskularisiertem Verbundgewebe in einem Nagetiermodell modulieren

Chien-Chang Chen, Shigeru Goto, Chia-Chun Tsai und Yur-Ren Kuo

Unsere früheren Studien haben gezeigt, dass aus Fettgewebe gewonnene Spenderstammzellen (ASCs) in Kombination mit einer kurzfristigen immunsupprimierenden Therapie das Überleben einer Allotransplantation von vaskularisiertem Verbundgewebe (VCA) in einem Hintergliedmaßenmodell bei Nagetieren verlängern können. In dieser Studie haben wir untersucht, ob die Homing- und Migrationsbewegungen von Spender-ASCs das Überleben von VCAs modulieren können. Es wurden orthotope Hintergliedmaßentransplantationen von männlichen Wistar-Ratten auf Lewis-Ratten durchgeführt (Tag 0). Spender-ASCs wurden aus dem Fettgewebe vermehrt und die Subkultur stammte von transgenen Wistar-Ratten mit grünem fluoreszierendem Protein (GFP). Die transplantierte Ratte (GFP-negativer Lewis) erhielt ein immunsuppressives Protokoll ähnlich unserem vorherigen Entwurf, einschließlich kurzfristigem Cyclosporin-A (CsA, Tage 0 – +20), Anti-Lymphozytenserum (ALS; 0,5 ml ip; –4, +1) und drei Runden GFP+-ASCs (2 × 106 Zellen/Zeit, iv an den Tagen +1, +7 und +21). Die Beurteilung der Transplantation verschiedener Spender- und Empfängergewebe wurde mittels Immunfluoreszenzfärbung durchgeführt. Zur Quantifizierung der GFP+-ASCs wurde eine Durchflusszytometrie durchgeführt. Die Ergebnisse zeigten, dass das Überleben der Allotransplantate ausschließlich in der ASC-ALS-CsA-Gruppe signifikant verlängert war (> 100 Tage), was gut mit der langfristigen Existenz GFP-positiver ASCs des Spenders im Empfänger korrelierte. Die Durchflusszytometrie-Analyse zeigte auch eine scheinbare Expression von GFP+-ASCs im peripheren Blut des Empfängers 2 Wochen nach der ASC-Infusion, jedoch eine verzerrte Abnahme nach der Transplantation. Die an Gewebebiopsieproben durchgeführte Immunfluoreszenzfärbung ergab, dass die GFP-positiven Zellen 2 Wochen nach der ASC-Injektion in der Allohaut und in der Haut sowie im Leber- und Milzparenchym des Empfängers vorhanden waren. 16 Wochen nach der Transplantation wurden jedoch keine offensichtlichen Expressionen von GFP+-ASCs in den Empfängergeweben gefunden, außer im Milzparenchym des Empfängers. Diese deuten darauf hin, dass Spender-ASCs langfristig im Milzgewebe des Empfängers vorhanden waren und zirkulierendes Blut zu einer Verlängerung des Allograft-Überlebens führen kann.