Motofumi Shimizu, Satomi Yanase, Chang Myint OO, Masatoshi Okamatsu, Yoshihiro Sakoda, Hiroshi Kida und Hiroshi Takaku
Hintergrund: Zeitweilige Ausbrüche hochpathogener Vogelgrippevirusinfektionen (Grippe) verdeutlichen das Potenzial für eine pandemische Ausbreitung dieser tödlichen Krankheit, weshalb die Entwicklung ausreichender Mengen sicherer Impfstoffe erforderlich ist. Influenzavirusähnliche Partikel (VLPs) wurden als vielversprechender Impfstoffkandidat für Grippeimpfungen auf der Basis von Zellkulturen, die nicht aus Eiern oder Säugetieren stammen, vorgeschlagen. Hämagglutininhaltige VLPs haben sich bereits als wirksam gegen homologe Virusstämme erwiesen. In diesem Bericht beschreiben wir die Entwicklung eines H5N1-Grippe-VLP-Impfstoffs, der nur drei Strukturproteine des Grippevirus (HA, NA und M1) enthält, die aus einem Vogelgrippevirus A/duck/Hokkaido/vac-1/2004 (H5N1) gewonnen wurden. Die aus Insektenzellen produzierten H5N1-VLPs zeigten Hämagglutinations- und Neuraminidase-Aktivitäten und erzeugten eine Immunreaktion bei BALB/c-Mäusen. Zusätzlich führten wir Virusprovokationsstudien mit Hühnern durch. Methodik und Ergebnisse: VLPs, bestehend aus den Proteinen Hämagglutinin (HA), Neuraminidase (NA) und Matrix 1 (M1) von A/duck/Hokkaido/vac-1/2004 (H5N1), wurden mithilfe von Baculoviren in Spodoptera frugiperda (Sf9)-Zellen übertragen. Mäuse wurden zunächst mit VLPs immunisiert und die Immunantwort zwischen mit HA und NA-HA-negativen M1-VLPs geimpften Tieren verglichen. Die IgG-Spiegel der mit HA-M1-VLP und NA-M1-VLP behandelten Gruppen wurden beobachtet und in den mit HA-NA-M1-VLP immunisierten Mäusegruppen wurden 5-fach höhere Spiegel H5N1-spezifischer Antikörper induziert. Die HA-NA- und HA-NA-M1-VLP-Impfstoffe induzierten IgG2a- und IgG2b-Antikörper sowie IgG1-Antikörper, was darauf hindeutet, dass sowohl Th1- als auch Th2-Immunantworten induziert wurden. Darüber hinaus induzierte die NA-M1-Immunisierung IgG- und IgG1-Isotyp-Antikörper und führte zu niedrigen IgG2a- und IgG2b-Spiegeln. Darüber hinaus waren alle mit HA-NA-M1 Vlp immunisierten Hühner vor tödlichen Infektionen mit dem hochpathogenen Vogelgrippevirus A/chicken/Yamaguchi/4/2004 (H5N1) geschützt. Schlussfolgerungen: Die intramuskuläre Verabreichung von H5 Vlps verlieh Immunität gegen eine tödliche virale Herausforderung. Der H5 Vlp-Impfstoff war erfolgreicher bei der Auslösung von Th1-verzerrten Schutzreaktionen, einschließlich der IgG2a-Produktion. Daher bieten Grippe-Vlps einen wichtigen Ansatz für die Immunisierung, insbesondere im Falle einer Pandemie. Angesichts des aktuellen Stands der Impfstrategien ist es zwingend erforderlich, die damit verbundene Immunogenität und Abwehrfähigkeit von H5 Vlps im Vergleich zu inaktivierten Vollviren und abgeschwächten lebenden H5N1-Viren zu untersuchen. Diese Ergebnisse unterstützen die weitere Entwicklung von Vlps als Formulierung für einen Impfstoff gegen Grippeinfektionen.