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Abstrakt
In vitro-Erhaltung der Riechschleimhaut: mit angereicherten olfaktorischen Hüllzellen
Neetu Singh, Saroj C Gopal, Rajeshwar N Srivastava, Tulika Chandra, Satya P Agarwal, Sanjay K Singh, Devendra K Gupta und Anil K Balapure
Die menschliche Riechschleimhaut (OM) reguliert den Geruchssinn durch axonale Regeneration und Myelinisierung, die durch Stammzellen und in der Nische ansässige olfaktorische Hüllzellen (OECs) vermittelt wird. Gereinigte OECs/olfaktorische Biopsien wurden zur funktionellen Wiederherstellung in verschiedenen Modellen für Rückenmarksverletzungen (SCI) verwendet. Jüngste Berichte halten dies jedoch für umstritten, da wir eine Primärkultur von OM, Basalzellen des Riechepithels und olfaktorischen ektomesenchymalen Stammzellen vorschlagen. Unsere definierten Kulturbedingungen verbessern die Lebensdauer von OM durch Anreicherung von OECs und bieten eine Strategie für den Einsatz zur Reparatur von SCI/Cochlea-Schäden. Kurz gesagt, OM wurde nach der Entnahme nicht-enzymatisch in Scheiben geschnitten, 6 Wochen lang kultiviert und die Zellen morphologisch, immunzytochemisch und per Western Blotting charakterisiert. Am 21. Tag zeigten etwa 70 % der mit GFAP und p75NTR gefärbten, spindelförmigen, astrozytenähnlichen und abgeflachten, blattartigen OECs eine axonale Remyelinisierung. Am 30. Tag wurde eine dichte, überlappende Zellmasse gefunden, die Caspase 3, 8, 9 (Genprodukt und Aktivität), Phospho-p53-negativ, GFAP und p75NTR-positiv war. Dies ging durch GFAP-Färbung nach 6 Wochen mit degenerativen Veränderungen einher. Umgekehrt führte die Trypsinierung am 21. Tag zu >95 % OECs mit abgeflachter Morphologie, GFAP- und p75NTR-Positivität. Die vom Menschen stammenden OECs wurden mit den 2 Tage alten SD-Riechkolbenzellen von Ratten verglichen, die 2 Wochen lang in F12-Medium kultiviert wurden (GFAP- und p75NTR-positiv). Daher bietet die kultivierte Riechschleimhaut, die eine Axonregeneration mit OECs in der Kultur aufweist, ein Mittel für Studien zur Reparatur von SCI-/Cochlea-Schäden.