J. Alex Pasternak, Siew Hon Ng, Tobias Käser, François Meurens und Heather L. Wilson
Aus peripherem Blut gewonnene mononukleäre Zellen (PBMCs) und mononukleäre Zellen der Lamina propria (LPMCs), die ex vivo mit Mitogenen stimuliert wurden, können erhebliche Unterschiede zwischen den einzelnen Tieren aufweisen, was zu Schwierigkeiten bei der Interpretation der Reaktionen bei einer anderen Tierart führt. Gemischte Zellpopulationen wurden ex vivo mit 2,5 μg/ml Con A oder 2,5 ng/ml PMA plus 250 ng/ml Ionomycin (PMAi; (nur LPCMs)) oder dem Medium allein für 72 Stunden stimuliert. Anschließend wurden die Überstände mit einem Bioplex-Test auf porcines IFNα, IFNγ, IL-10 und IL-12 auf Zytokinproduktion getestet. Nicht stimulierte PBMCs wiesen signifikante IL-10-Werte auf und der Medianwert für diese Gruppe sank in Gegenwart von Con A. Con A induzierte jedoch die Produktion von IFNα und IFNγ, jedoch nicht von IL-12 in dieser Zellpopulation. Im Gegensatz dazu produzierten nicht stimulierte und mit Con A stimulierte LPMCs vernachlässigbare Mengen an IL-10, IFNα, IFNγ und die Mehrheit der LPMCs der Tiere zeigte eine vernachlässigbare IL-12-Produktion als Reaktion auf Con A. Im Gegensatz dazu produzierten mit PMAi stimulierte LPMCs IFNγ, was darauf hindeutet, dass die Zytokinproduktion eine mitogenspezifische Reaktion ist. Als wir tierspezifische Reaktionen verfolgten, beobachteten wir, dass diskrete Untergruppen von PBMCs der Tiere auf Con A mit einer signifikant erhöhten oder verringerten IL-10-Produktion im Vergleich zu nicht stimulierten Zellen reagierten. Darüber hinaus produzierten einige Zellen in den LPMCs kein IL-12 als Reaktion auf Con A, zeigten aber eine erhöhte Produktion als Reaktion auf PMAi, während andere eine Produktion von IL-12 als Reaktion auf Con A, aber keine Reaktion auf PMAi zeigten. Die Durchflusszytometrieanalyse zeigte, dass die PBMCs eine Mischung aus CD3+ T-Zellen>CD21+ B-Zellen>CD172+ myeloiden Zellen waren, während die LPMCs hauptsächlich aus zytotoxischen T-Zellen und natürlichen Killerzellen bestanden. Der Prozentsatz an CD8α+CD4+ Antigen-erfahrenen T-Zellen war in den LPMCs im Vergleich zu den PBMCs höher. Wie bei einer ausgezüchteten Art zu erwarten, gibt es tierspezifische Unterschiede in der Zytokinproduktion als Reaktion auf Stimulanzien und diese können die Interpretation der Ergebnisse verfälschen, wenn sie nicht individuell verfolgt werden.