Hassan Dana, Ali Mazraeh, Ghanbar Mahmoodi Chalbatani, Vahid Marmari, Habibollah Mahmoodzadeh, Ali Ghamari, Fateme Moazen, Mohammad Ebrahimi und Narges Mehmandoost
Einleitung: ALCAM ist als Glykoprotein ein Mitglied der Immunglobulinfamilie und spielt eine wichtige Rolle bei Zellwachstum, -überleben und -motilität. Dieses Protein trägt auch zur Entwicklung von Tumorinvasionen bei Dickdarm- und Brustkrebs bei und wird üblicherweise als Krebsstammzellmarker betrachtet. ALCAM ist ein Zelloberflächenantigen, das bei einigen Krebsarten wie Dickdarm- und Brustkrebs stark exprimiert wird, und hat das Potenzial, diese Krebsarten zu diagnostizieren und zu behandeln. Ziele: Wie andere Membranproteine stellt ALCAM ein potenzielles Ziel für die Therapie von Dickdarm- und Brustkrebs dar. Daher zielt diese Studie darauf ab, C2- und V-Domänen zu klonen und zu exprimieren, um sie in praktischen, diagnostischen und therapeutischen Plänen zu verwenden. Methoden: In dieser Studie wurde die Sequenz der C2- und V-Domänen mithilfe von Online-Tools für die Expression in prokaryotischen Wirten optimiert und in pET-28a-Expressionsplasmide geklont. E. coli BL21 (DE3)-Zellen wurden mithilfe der Hitzeschockmethode mit rekombinanten pET-28a-Plasmiden transformiert und die Expression der rekombinanten V- und C2-Domänen mithilfe der SDS-PAGE-Technik untersucht. Ergebnisse: Die synthetischen Gene der C2- und V-Domänen befanden sich zwischen den Restriktionsstellen NcoI/BamHI und XhoI und wurden in den Vektor pBSK (+) kloniert. Das Vorhandensein dieser Gene in pET28a wurde durch Koloniebildung festgestellt und durch Restriktionsverdau bestätigt. Die Gene der C2- und V-Domänen wurden in E. coli BL21 DE3 exprimiert. Die Ergebnisse der SDSPAGE-Technik bestätigten die Expression der rekombinanten 23- und 29-kDa-C2- und V-Domänen in einem bakteriellen Expressionssystem. Schlussfolgerungen: Die Gene der C2- und V-Domänen wurden rekombinant in E. coli exprimiert. Diese rekombinanten Fragmente können als diagnostische und therapeutische Kandidaten für Screening und Krebstherapie bei Patienten mit Dickdarm- und Brustkrebs eingesetzt werden.