Zeitschrift für Stammzellforschung und -therapie

Abstrakt

Charakterisierung von Kohlenhydrat-Oberflächenmarkern auf embryonalen Stammzellen von Mäusen

Zhenwei He, Yue An, Gang Shi, Yingwei Lin, Jiliang Hu und Yali Li

Die Glykosylierung von Proteinen und Lipiden auf der Zelloberfläche hat sich als wichtig für die Aufrechterhaltung der Pluripotenz und des Stammzellschicksals in embryonalen Stammzellen erwiesen. Lektine werden häufig verwendet, um Kohlenhydratmodifikationen auf der Zelloberfläche embryonaler Stammzellen zu charakterisieren und so Pluripotenz und Stammzellschicksal zu bestimmen. In der vorliegenden Studie wurde ein Panel aus 14 Lektinen und Kohlenhydratantikörpern verwendet, um die Kohlenhydratoberflächenmarker embryonaler Stammzellen (ES-Zellen) von Mäusen zu charakterisieren. SSEA-1-positive Maus-ES-Zellen wurden zunächst angereichert und das Kohlenhydratprofil der Zellen wurde mittels Durchflusszytometrie und Immunzytochemie bestimmt. Die Anreicherung der Maus-ES-Zellen ergab ungefähr 99,95 ± 0,87 % SSEA-1-positive Maus-ES-Zellen. Ein gleichmäßiger und hoher Prozentsatz an Bindung wurde für PNA, DSL, JAC, GNL, PSA und LTL beobachtet, wobei PNA, DSL, JAC und GNL einen ähnlichen Prozentsatz an Bindung an SSEA-1 (99,9 %) aufwiesen, während die Bindung bei PSA und LTL etwa 95–99 % betrug. In Maus-ES-Zellen wurde eine teilweise Bindung von WFL, SNA und AAL beobachtet, was sich auch in den jeweiligen immunzytochemischen Bildern widerspiegelte. Ein sehr niedriger Prozentsatz an Bindung wurde für MAA und UEAI beobachtet. Die Daten zeigten, dass auf der Zelloberfläche von Maus-ES-Zellen eine hohe Expression von Mannose, N-Acetyllactosamin und Galactose vorhanden ist. Einige zuverlässige Oberflächenmarker, die zur Bestimmung der Pluripotenz verwendet werden können, sind PNA, DSL, JAC und GNL, die eine ähnliche Bindung wie SSEA-1 zeigten, ein gut etablierter pluripotenter Marker. Zusammengenommen haben die Daten Informationen zum Kohlenhydratprofil der Zelloberfläche von Maus-ES-Zellen geliefert.