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Abstrakt
Analyse der Expression und Modulation ausgewählter immunbezogener Gentranskripte in der DLEC-Zelllinie des Europäischen Wolfsbarsches ( Dicentrarchus labrax L.)
Francesco Buonocore *,Elisa Randelli,Niels Lorenzen,Katja Einer-Jensen,Giuseppe Scapigliati
Aus verschiedenen Fischarten wurden Zelllinien speziell zur Virusisolierung und zum Studium der Wechselwirkungen zwischen Zellen und Pathogenen entwickelt, weshalb sie für die Aquakultur von Interesse sind . In diesem Artikel haben wir das Vorhandensein und die Regulierung einiger Immungene in der DLEC-Zelllinie (Dicentrarchus labrax embryonale Zellen) aus dem Europäischen Wolfsbarsch (Dicentrarchus labrax L.) untersucht, um ihre Wirkung vorläufig aufzuklären. Die basale Expression der ausgewählten Gene (Interleukin-1? (IL-1?), Cyclooxygenase-2 (COX-2), Transformierender Wachstumsfaktor-? (TGF-?), CD8-?, Haupthistokompatibilitätskomplex II-? (MHC II-?), Interferon (IFN) und Mx-Protein (Mx)) wurde untersucht und anschließend ihre Modulation sowohl nach Stimulation mit verschiedenen mitogenen Wirkstoffen als auch nach einer Transfektion mit einer Sequenz untersucht, die das Hüllprotein des Nervennekrosevirus (NNV) von Fischen kodiert . Die Ergebnisse haben gezeigt, dass die Entzündungsmoleküle (IL-1?, COX-2, TGF-?), die von der DLEC-Zelllinie konstitutiv exprimiert werden, durch die Stimulation mit Lipopolysacchariden (LPS) aus E. coli nicht hochreguliert werden, obgleich die Expression der T-Zellmarker-Transkripte (CD8-?, MHC II-?) durch die Wirkung eines Lektins aus Phaseolus vulgaris (PHA-L) beeinflusst wird. Schließlich führte die Expression des Hüllproteins NNV in der DLEC-Zelllinie nach der Transfektion zu einer starken Hochregulierung der IFN- und Mx-Gentranskripte. Diese Daten legen nahe, dass die DLEC-Zelllinie spezifische pathogenassoziierte molekulare Muster (PAMPs) erkennt und daher für die Untersuchung von T-Zell-Signalwegen und viralen Reaktionen bei Wolfsbarschen nützlich sein könnte, ohne dass lebende Versuchstiere verwendet werden müssen.