Abstrakt

Ein neuer Sandwich-ELISA-Test zum gleichzeitigen Nachweis der E7-Proteine ​​von HPV-16, 18 und 45 in Gebärmutterhalsabstrichen

Christina Metzger, Annabella Pittl, Andreas M. Kaufmann, Theodoros Agorastos, Kimon Chatzistamatiou, Oliver Böcher, Werner Zwerschke, Haymo Pircher, Isabel Koch und Pidder Jansen-Dürr

Hartnäckige Infektionen mit Hochrisiko-Papillomaviren (HPV) sind der wichtigste ätiologische Faktor für Gebärmutterhalskrebs , und E7-Onkoproteine ​​wurden als neue Marker für die Tumorentwicklung vorgeschlagen. Ziel dieser Studie war die Entwicklung eines neuen Nachweissystems auf Basis eines Enzymimmunoassays (ELISA) zur Überwachung der Expression von E7-Proteinen der Hochrisiko-HPV (hrHPV)-Typen HPV-16, HPV-18 und HPV-45 in Gebärmutterhalsabstrichen. Unter Verwendung einer Kombination aus monoklonalen Kaninchen-Antikörpern, die gegen die E7-Proteine ​​von HPV-16 bzw. HPV-18/HPV-45 gerichtet sind, wurde ein trivalenter E7-ELISA entwickelt und validiert, wobei rekombinante E7-Proteine ​​verschiedener HPV-Typen und Lysate aus E7-positiven Gebärmutterhalskrebszellen verwendet wurden. Als Nachweisgrenze wurde eine Menge von 0,5 Pikogramm E7-Protein pro Vertiefung festgelegt. Der E7-ELISA wurde verwendet, um die E7-Proteinwerte in Gebärmutterhalsabstrichen von insgesamt 67 Frauen zu bestimmen. Die E7-Proteinkonzentration lag in allen HPV-negativen Abstrichen unter der Nachweisgrenze, und in einigen HPV-positiven Gebärmutterhalsproben wurden E7-Proteinkonzentrationen über dem Hintergrundwert gefunden. Zusammen bietet die hier beschriebene Arbeit ein neues Werkzeug für die gleichzeitige Erkennung von E7-Proteinen der drei bei Gebärmutterhalsneoplasien am häufigsten vorkommenden hrHPV -Typen.

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