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Abstrakt
Western Blot-Nachweis von Xanthomonas Oryzae pv. Oryzae in Reis
Meicen Guo, Jinping Lan, Jianan Shi, Mingli Guan, Jian Wei, Lijuan Liu, Liyun Li, Shijuan Dou und Guozhen Liu
Bakterielle Brandkrankheit, verursacht durch Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), ist eine schwere Reiskrankheit, und die Wechselwirkungen zwischen Reis und Xoo bilden ein Modellsystem in der Erforschung der Resistenz gegen Pflanzenkrankheiten. Um Immuntechniken für den Nachweis von Xoo zu etablieren, wurde ein Xoo-spezifischer polyklonaler Antikörper unter Verwendung des gesamten Xoo-Proteins als Immunogen erzeugt. Es wurde ein Western-Blot-Verfahren entwickelt, mit dem bereits 3.500 Xoo-Zellen nachgewiesen werden können. Xoo kann in Reis 1 Tag nach der Inokulation (dpi) nachgewiesen werden, und 2 dpi wurde ein signifikanter Unterschied zwischen der Anzahl der Xoo-Zellen bei resistenten und anfälligen Reaktionen festgestellt. Bei der inkompatiblen Reis-Xoo-Wechselwirkung kann Xoo 10 dpi innerhalb von 6 cm der inokulierten Stelle nachgewiesen werden. Bei der kompatiblen Interaktion kann Xoo innerhalb von 12 cm von der Inokulationsstelle nachgewiesen werden, während jenseits dieses Bereichs in inokulierten und nicht inokulierten Blättern kein Xoo-Signal nachgewiesen wurde. Dies stützt die Hypothese, dass Reispflanzen mit Resistenzgenen eine stärkere hemmende Wirkung auf die Xoo-Vermehrung haben. Diese Methode wird voraussichtlich die traditionelle Art und Weise ersetzen, Bakterienzellen in Labors zu zählen und mit Xoo infizierten Reis auf Reisfeldern zu untersuchen.