Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrakt

Validierte Umkehrphasen-Flüssigkeitschromatographiemethode zur gleichzeitigen Bestimmung von Dextromethorphan und Chlorpheniramin in nicht-biologischen und biologischen Matrices unter Verwendung eines PDA-Detektors

Najam ud Din, Shafi H, Imran M, Sarwar M, Tahir MA und Khursheed S

Eine einfache, präzise und empfindliche Umkehrphasen-HPLC-Methode mit Photodiodenarraydetektor zur gleichzeitigen Bestimmung von Dextromethorphan (DXM) und Chlorpheniramin (CLP) in verschiedenen Matrizen wurde entwickelt und validiert. Die Trennung erfolgte innerhalb von 8 Minuten auf einer C-18-Säule (15 cm x 4,6 mm x 5 μm) unter Verwendung von Methanol/pH 3,0 Kaliumdihydrogenphosphatpuffer (60:40, v/v) als mobiler Phase in einem isokratischen Elutionsmodus mit einer Flussrate von 0,8 ml/min und UV-Detektion bei 230 nm. Zur Quantifizierung wurde ein externer Standard verwendet. Die aktuelle Methode zeigte eine gute Linearität im Bereich von 1–200 µg/ml für CLP (Retentionszeit 3,83 ± 0,10 min) mit r2 von 0,9994 und 2–1000 µg/ml für DXM (Retentionszeit 5,02 ± 0,10 min) mit R2 von 0,9993. Die Nachweis- und Bestimmungsgrenzen lagen bei 0,25 µg/ml und 1,0 µg/ml für CLP und 0,50 µg/ml und 1,5 µg/ml für DXM. Es wurden keine Interferenzen durch Matrizen beobachtet und die Proben blieben im HPLC-Injektor 12 Stunden lang stabil. Die entwickelte Methode war genau und verwendete ein einfaches Flüssig/Flüssig-Extraktionsverfahren mit einer Rückgewinnung im Bereich von 90,0 %–101,9 % für beide Analyten. Die Intra- und Inter-Day-Präzision betrug weniger als 2,5 %. Die Methode erwies sich als robust und reproduzierbar und ist auf pharmazeutische (aktive Rohstoffe, Sirupe) und biologische (Blut-)Matrices anwendbar.