Zeitschrift für Bioäquivalenz und Bioverfügbarkeit

Abstrakt

UPLC-MS/MS-Quantifizierung von Fenspirid in menschlichem Plasma

Yuriy V Pidpruzhnykov, Valerii E Sabko, Volodymyr V Iurchenko und Igor A Zupanets

Eine neue einfache und schnelle Ultra-Performance-Flüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie-Methode (UPLC-MS/MS) wurde für die Quantifizierung von Fenspirid in menschlichem Plasma entwickelt und validiert. Nach einer einfachen Proteinfällung mit Acetonitril wurden der Analyt und der interne Standard (Bupivacain) auf einer ACQUITY UPLC ® BEH С18-Säule (50 mm×2,1 mm, 1,7 μm) getrennt, wobei eine Gradientenmischung aus Acetonitril und Wasser (beide enthalten 0,2 % Ameisensäure) als mobile Phase bei einer Flussrate von 0,4 ml/min verwendet wurde. Die Retentionszeit von Fenspirid und Bupivacain betrug 0,64 bzw. 0,87 min. Die Detektion erfolgte im positiven Modus durch Überwachung der Übergänge von m/z 261→105 für Fenspirid und m/z 289→140 für Bupivacain. Die untere Bestimmungsgrenze betrug 2 ng/ml bei Verwendung von 200 μl Aliquots Plasma. Der Bestimmungsbereich von Fenspirid betrug 2-500 ng/ml. Die Präzision der Analyse innerhalb und zwischen den Durchläufen betrug <9,5 %, die Genauigkeit reichte von 91,5 % bis 112,4 %, die durchschnittliche Wiederfindung von 99,3 % bis 101,9 %. Der Analyt war in menschlichem Plasma nach drei Gefrier-/Auftauzyklen und für 5 Monate nach Lagerung bei -70 °C stabil. Die Methode wurde erfolgreich bei der Bioäquivalenzstudie von generischen und Marken-beschichteten Tabletten von Fenspirid angewendet.