Zeitschrift für Membranwissenschaft und -technologie

Abstrakt

Die anti-apoptotische Wirkung der Hämolymphe von Lonomia obliqua ist mit dem mitochondrialen Signalweg verbunden

Ronaldo Z. Mendonça, Luciana Moreira Martins

Der Tod durch Apoptose ist ein sehr wichtiger Faktor in Produktionsprozessen, der die industrielle Produktion einiger wirtschaftlich interessanter Proteine ​​begrenzt. Eine Möglichkeit, die zelluläre Produktivität zu steigern, besteht jedoch darin, den Zelltod zu hemmen oder abzuschwächen. Kürzlich haben wir das Vorhandensein eines potenten antiapoptotischen Proteins in der Hämolymphe von Lonomia obliqua nachgewiesen , das die Lebensfähigkeit der Zellkultur durch Verhinderung der Apoptose verlängert. Andererseits wurde berichtet, dass Mitochondrien eine wichtige Rolle im Apoptosekontrollprozess spielen, nämlich dass die Mitochondrienmembranpermeabilisierung (MMP) ein wichtiger Schritt in diesem Prozess sein kann. MMP, ob verbunden mit oder ohne Verlust des elektrochemischen Potenzials der Mitochondrien und Veränderung der Matrix, ist für die Freisetzung von Proteinen zwischen den Membranen (z. B. Cytochrom C, AIF usw.) aus dem Zytosol verantwortlich. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass die Zugabe eines Proteins aus der Hämolymphe von Lonomia obliqua zur Kultur zu einer Verlängerung der Zelllebensdauer (3 – 4 Tage) und zu einem hohen elektrochemischen Potenzial der Mitochondrien führte. Dieses Protein kann in der Mitochondrienmembran wirken und den Verlust der Membrandurchlässigkeit und die Freisetzung von Cytochrom C verhindern. Als positive Kontrolle wurde in diesen Kulturen Apoptose-Tod durch 50 μm t-BHP oder 600 μm H2O2 herbeigeführt _{. Das} Vorhandensein von Apoptose wurde mittels Durchflusszytometrie, elektronischer Mikroskopie und Agarosegelelektrophorese festgestellt. Das elektrochemische Potenzial der Mitochondrien wurde mittels JC-1, Hoechst 33324 und DIOC6 bestimmt. Cytochrom C wurde im Zytosol mittels eines Anti-Cytochrom-Antikörpers identifiziert.