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Abstrakt
Sukzessive Konstruktion von β-Glucosidase-Hyperproduzenten von Trichoderma Harzianum mittels mikrobieller Biotechnologie
Ahmed M. El-Bondkly, AAM Aboshosha, NH Radwan und SA Dora
In einem Versuch, bessere Trichoderma harzianum- Isolate zur Verbesserung der β-Glucosidase-Produktivität zu konstruieren, wurde eine Induktion von Mutanten durchgeführt. Nach Anwendung von UV-Bestrahlung und Ethylmethansulfonat (EMS) wurden 461 Isolate erhalten, davon 99 nach UV-Anwendung und 362 Isolate nach EMS-Behandlungen. Fünf Isolate (zwei nach UV-Anwendung und drei nach EMS-Behandlungen) wurden aufgrund ihrer hohen Produktivität beider Enzyme ausgewählt, um im zweiten Schritt der Induktionsmutation mit Colchicin-Dosen (0,1 % und 0,2 %) behandelt zu werden. Nach der Colchicin-Behandlung wurden 191 Isolate erhalten, davon 40 Isolate nach der Behandlung des Wildtypstamms, 70 Isolate nach der Behandlung der beiden UV-induzierten Mutanten mit Colchicin und 81 Isolate nach der Behandlung der drei EMS-induzierten Mutanten mit Colchicin. Diese Isolate wurden auf ihre CMCase- und β-Glucosidase-Produktivität getestet. Ein Isolat (D1/4) erwies sich als der größte Produzent der beiden Enzyme, da es 160 % bzw. 186 % CMCase und β-Glucosidase mehr produzierte als der ursprüngliche Stamm. Darüber hinaus wurden der höchste DNA-Gehalt und auch die höchsten Mengen an CMCase und β-Glucosidase nach der EMS-Behandlung mit anschließender Colchicin-Anwendung erhalten.