Zeitschrift für mikrobielle und biochemische Technologie

Abstrakt

Screening und molekulare Charakterisierung natürlicher Pilzisolate, die Lovastatin produzieren

Upendra RS, Pratima Khandelwal, ZR Amiri, L Shwetha und Mohammed Ausim S

Aspergillus sp. ist bekannt dafür, das cholesterinsenkende Medikament Lovastatin zu produzieren. Es wurden nur begrenzte Untersuchungen zur Untersuchung ertragreicher Stämme aus bisher nicht ausreichend genutzten natürlichen Quellen durchgeführt. Zu diesem Zweck wurden in der vorliegenden Studie verschiedene Pilzkulturen (130 an der Zahl) aus natürlichen Quellen wie (Erde von Reisfeldern, Austernpilzbänken von den Feldern und Kompost) aus verschiedenen Regionen im Landesinneren von Karnataka und Tamil Nadu in Indien isoliert. Alle Isolate wurden durch standardmäßige mikrobiologische Methoden wie morphologische und mikroskopische Methoden identifiziert. Diese Isolate wurden zur Produktion von Lovastatin durch ein Submersfermentationsverfahren (SmF) weiter kultiviert. Der Extrakt aus jedem Isolat wurde drei Replikaten einer UV-Spektrophotometrie-Quantifizierung (200-350 nm) unterzogen. Die Bestätigung der Metabolitenproduktion wurde durch HPLC und ATR-FTIR-Chromatographie (Attenuated Total Reflectance) unter Verwendung des Medikaments Lovastatin (Biocon Laboratories) als Standard erreicht. Durch Anwendung von Selektionsdruck wurden insgesamt neun Pilzstämme mit hohem Lovastatin-Ertrag ausgewählt. Der Extrakt (Lovastatin) dieser Stämme aus submerser Fermentation (SmF) wies im Bioassay auch die maximale Hemmzone (≥ 10 mm) gegen Neurospora crassa (MTCC-790) auf. Als Pilzstämme mit dem höchsten Lovastatin-Ertrag ermittelten wir Aspergillus terreus (SSM4) aus Austernseitlingen, der den höchsten Lovastatin-Ertrag (996,6 mg/l) lieferte, gefolgt von Aspergillus terreus (SSM3) aus Kompost (900 mg/l) und Aspergillus flavus (SSM8) aus Kompost (643 mg/l). Das ertragreichste Aspergillus terreus-Isolat (SSM4) wurde mittels β2-Tubulin-Gensequenzierung charakterisiert und durch phylogenetische und molekulare Evolutionsanalysen mit der Software MEGA Version 5 bestätigt. In der vorliegenden Studie wurden drei Pilzisolate mit hohem Lovastatin-Gehalt aus natürlichen Proben isoliert. Einer der Isolate mit dem höchsten Gehalt wurde sequenziert und im MTCC (IMTECH) Chandigarh mit der Zugangsnummer Aspergillus terreus nhceup 11045 hinterlegt.