Abstrakt

Screening und Charakterisierung bakterieller Chitosanase aus der Meeresumwelt

Ekowati Chasanah, Dewi Seswita Zilda und Agustinus R.Uria

Es wurde ein Screening auf extrazelluläre Chitosanase aus Bakterienisolaten durchgeführt, die mit Meeresschwämmen assoziiert sind. Von 100 Bakterienisolaten waren 40 Isolate in der Lage, auf dem Chitinmedium Klärzonen zu bilden, und ein Isolat, 34-b, wies den höchsten chitinolytischen Index auf. Die Enzyme wurden auf einem flüssigen Chitinmedium bei 37 °C in einem Schüttelwasserbad für eine fünftägige Kultivierung produziert. Rohe Enzyme wurden durch zellfreies Überstand (CFS) hergestellt und durch 70 % (gesättigte) Ammoniumsulfatfällung, gefolgt von Dialyse, konzentriert. Die Enzyme funktionierten am besten bei einem pH-Wert und einer Temperatur von 6–7 bzw. 60 °C. Die Halbwertszeit (T1/2) der Chitosanaseaktivität betrug 500,2 Minuten oder 8,34 Stunden (bei 37 °C) und 55,12 Minuten (bei 50 °C), was darauf hindeutet, dass die Enzyme bei dieser Temperatur ziemlich stabil sind. Allerdings gingen nach 15-minütiger Inkubation bei 60 °C etwa 80 % der ursprünglichen Aktivität verloren.

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