Bioenergetik: Offener Zugang  

Abstrakt

Empfehlungen für die kurzfristige Kultivierung lebensfähiger stäbchenförmiger Rattenkardiomyozyten

Rabia Johnson, PhiwayinkosiVusi Dludla, Christo John Frederick Muller, Faghri February und Johan Louw

Primäre In-vitro- Kulturen isolierter Kardiomyozyten adulter Ratten werden zu einem immer beliebteren Modell zur Untersuchung von Stressfaktoren des Herzmuskels. Dieses Modell kann in einer kontrollierten Umgebung leicht manipuliert werden und die erzielten Ergebnisse können wertvolle Einblicke in die Pathophysiologie von Herzerkrankungen liefern. In den letzten Jahren wurden mehrere verbesserte Methoden zur Entwicklung einer robusten Technik zur Erhaltung der Kardiomyozyten in Kultur beschrieben. Trotz dieser Fortschritte bleibt die Kultivierung primärer Kardiomyozyten jedoch eine Herausforderung. In dieser Studie präsentieren wir eine einfache, aber reproduzierbare Methode zur Isolierung und Kultivierung lebensfähiger stäbchenförmiger Kardiomyozyten. Kardiomyozyten wurden in ergänztem Medium 199 mit oder ohne fötales Rinderserum kultiviert. Ihre Lebensfähigkeit wurde mithilfe von Trypanblau beurteilt, während die Stoffwechselaktivität mithilfe eines Adenosin-5'-Triphosphat-Tests gemessen wurde. Die in dieser Studie erzielten Ergebnisse wurden verwendet, um allgemeine Richtlinien bereitzustellen, um Fallstricke im Zusammenhang mit geringen Kardiomyozytenerträgen und der daraus resultierenden schlechten Kultivierbarkeit von Kardiomyozyten zu vermeiden. Isolierte Kardiomyozyten, die in Gegenwart von fötalem Rinderserum kultiviert wurden, behielten ihre in vitro quergestreifte stäbchenförmige Morphologie 72 Stunden lang in Kultur bei, danach flachten sie ab und breiteten sich aus. Kardiomyozyten, die ohne fötales Rinderserum kultiviert wurden, blieben dagegen bis zu 120 Stunden lang stäbchenförmig.