Zeitschrift für Bioäquivalenz und Bioverfügbarkeit

Abstrakt

Schnelle quantitative Bewertung von Amphotericin B in menschlichem Plasma mittels validierter HPLC-Methode

Pavan Balabathula, Dileep R. Janagam, Nivesh K. Mittal, Bivash Mandal, Laura A. Thoma und George C. Wood

Es wurde eine einfache, schnelle und empfindliche HPLC-Methode entwickelt und validiert, um Amphotericin B (AmB) in menschlichem Plasma zu quantifizieren. AmB wurde durch einfache Proteinfällung mit Methanol aus angereichertem Plasma extrahiert. Die Trennung erfolgte auf einer XBridge TM C18-Säule (150 × 4,6 mm, 3,5 μm) mit einer mobilen Phase aus Essigsäure (0,73 %) – Acetonitril (60:40, v/v) und bei einer Flussrate von 1 ml/min. Der eluierte Peak von AmB wurde bei 408 nm mit einem Photodiodenarraydetektor (PDA) überwacht. Die Kalibrierungskurve erwies sich im AmB-Konzentrationsbereich von 1000 – 50 ng/ml als linear (r 2 >0,99). Die Inter- und Intra-Day-Präzisionen (%CV) lagen unter 11,2 %. Die Extraktionswiedergewinnungsraten lagen bei 85-91 %. Die entwickelte und validierte Methode ist einfach, schnell (<3 Min. pro Injektion), empfindlich und reproduzierbar. Sie kann potenziell für pharmakokinetische, bioäquivalenz- und toxikokinetische Studien von AmB verwendet werden.