Zeitschrift für Bakteriologie und Parasitologie

Abstrakt

Schneller Nachweis von NDM-, VIM-, KPC- und IMP-Carbapenemasen mittels Echtzeit-PCR

Ewa Kosykowska, Tomasz Dzieciątkowski und Grażyna Młynarczyk

Carbapeneme sind die wirksamsten Beta-Lactame und zeichnen sich durch ein breites Wirkungsspektrum gegen gramnegative und grampositive Bakterien aus. Leider ist die dynamische Ausbreitung der Carbapenemresistenz unter nichtfermentativen Bakterien und Enterobacteriaceae ein zunehmendes Problem und kann zu einer gefährlichen Einschränkung der Behandlungsmöglichkeiten führen. Unter den drei verschiedenen Resistenzmechanismen ist die Enzymproduktion von besonderer Bedeutung. In diesem Fall reicht nur ein kleines Gen aus, um eine Carbapenemresistenz hervorzurufen. Die Carbapenemasegene sind häufig Teil von Integronen, die verschiedene Reihen von Resistenzgenkassetten tragen, und nur ein einziges Übertragungsereignis reicht aus, um eine Multimedikamentenresistenz zu verbreiten. Darüber hinaus befinden sich Carbapenemasegene häufig in mobilen genetischen Elementen. Aus diesen Gründen sind Carbapenemasen epidemiologisch am wichtigsten. Durch frühzeitige Erkennung und Identifizierung von Carbapenemaseproduzenten unter klinischen Isolaten können nosokomiale Infektionen vermieden werden. Wir haben einen Multiplex-Echtzeit-PCR-Test auf Basis der TaqMan-Technologie zur schnellen Erkennung und Identifizierung der in Europa am häufigsten vorkommenden Carbapenemasen NDM, VIM, KPC und IMP entwickelt. Getestet wurden 31 Isolate von Enterobacteriaceae (n=15) und nicht-fermentativen gramnegativen Bakterien (n=16), die NDM-, VIM-, KPC-, IMP-, GIM- oder OXAs-Carbapenemasen aufnehmen. Das gesamte aufwendige Experiment, einschließlich DNA-Isolierung und PCR-Zyklus, dauert bis zu 2 Stunden.