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Abstrakt
REINIGUNG, CHARAKTERISIERUNG UND GENKODIERUNG VON XYLANASE AUS BACILLUS TEQUILENSIS SH0, ISOLIERT AUS KOMPOST UNTER VERWENDUNG VON KOSTENGÜNSTIGER WEIZENKLEIE ALS SUBSTRAT
Sanjeev Kumar, Nivedita Sharma und Shruti Pathania
Ein potentielles Bakterienisolat mit extrazellulärer cellulasefreier Xylanase-Aktivität von Bacillus tequilensis SH0 wurde aus Kompost isoliert. Das Isolat zeigte maximale Xylanase-Aktivität nach Optimierung mit COFAT, d. h. basalem Salzmedium bei 96 h, pH 5,5, Temperatur 45 °C, Inokulierungsgröße 10 %, Kohlenstoffquelle Weizenkleie (1,25 %). Als mehrstufige Reinigungstechniken wurden Ionenaustauschchromatographie und Gelausschlusschromatographie verwendet. Das Molekulargewicht wurde in einem Bereich von 14 kDa – 97,4 kDa ermittelt. Die gereinigte Xylanase zeigte eine optimale Aktivität von 41,30 IU/ml bei 90 °C, pH 6,0 auf Xylan und war zudem cellulasefrei. Km und Vmax der teilweise gereinigten Xylanase aus B. tequilensis SH0 betrugen 1,55 mg/ml und 125,0 µ mol/mg/min. Die Kodierung der für die Xylanaseproduktion verantwortlichen Gene erfolgte mittels Gradienten-PCR.