Zeitschrift für Küstenzonenmanagement

Abstrakt

Reinigung und Charakterisierung von Aeromonas Media Klu 11.16 Chitosanase, isoliert aus Garnelenabfällen

Ekowati Chasanah, Gintung Patantis, Dewi Seswita Zilda, Mahrus Ali und Yenny Risjani

Unsere vorherige Studie ergab, dass KLU 11.16, das aus Garnelenabfällen isoliert wurde, chitinolytische Enzyme absonderte. Das Rohenzym war interessant, da sein Chitooligosaccharid einige pathogene Bakterien hemmen konnte. In dieser Studie berichten wir über eine Reinigung und Charakterisierung des produzierten Chitosanase-Enzyms und die Identifizierung von KLU 11.16. Die Reinigung des Enzyms erfolgte in zwei Schritten durch Ionenaustauschchromatographie, gefolgt von Gelfiltration. Zwei von vier Peaks aus dem Gelfiltrationsschritt, d. h. Fraktion 16 und 33, waren in der Lage, 100 % desacetyliertes Chitosan zu hydrolysieren, was darauf hindeutet, dass beide Fraktionen das Chitosanase-Enzym enthielten. Das Enzym aus Fraktion 16 hatte ein ungefähres Molekulargewicht von 98,3 kDa. Das Enzym arbeitete optimal bei einer Temperatur von 300 °C und einem pH-Wert von 6. Die Zugabe von Ca2+-, Fe2+-, K+- und Na+-Ionen in Form von Cl2-Salz und dem Detergens Triton X-100 erhöhte die Enzymaktivität, während Co2+-, Mn2+- und Zn2+-Ionen in derselben Konzentration die Enzymaktivität verringerten. Die Zugabe von EDTA und SDS verringerte die Enzymaktivität deutlich. Die molekulare Identifizierung ergab, dass KLU 11.16 zu 99 % mit Aeromonas media identisch war.