Gentechnologie

Abstrakt

Mutationsanalyse des FOG2-Gens bei Patienten mit angeborener Herzerkrankung

Brindha Elangovan

Angeborene Herzfehler (CHD) sind Entwicklungsstörungen mit hoher Morbiditätsrate bei Säuglingen. Der Transkriptionsfaktor GATA-Bindungsfaktor 4 (GATA4) spielt Berichten zufolge eine wichtige Rolle bei der Embryogenese und Herzentwicklung. Ziel der Studie ist die Auswertung einer Mutationsanalyse des Gens FOG2 bei angeborenen Herzfehlern. Wir haben FOG2 ausgewählt, um seltene Variationen bei Patienten mit angeborenen Herzfehlern aus der indischen Bevölkerung zu identifizieren. Zur Auswertung der Studie haben wir die PCR-Amplifikation für Exon 7 und Exon 8 durchgeführt, da die meisten Zinkfingerdomänen von FOG2 in diesen beiden Exons liegen. Exon 8 wurde in 5 verschiedene Regionen unterteilt, dh Exon 8A-8E, da es eine lange Endecodierte Region hat. Diese Exons wurden unter verschiedenen Bedingungen amplifiziert. Zum Beispiel wurden Exon 8A-B und E mit Platinum-Taq-DNA-Polymerase amplifiziert, ohne dass PCR-Verstärker wie DMSO (Dimethylsulfoxid) oder Betain erforderlich waren. Exon 8C wurde jedoch in Gegenwart von DMSO amplifiziert. Die Annealing-Temperatur ist für jedes Exon unterschiedlich. Exon 7 ist eine amplifizierte Taq-DNA-Polymerase. Die Spezifität und Menge der amplifizierten Produkte werden anhand des 100-bp-DNA-Leiters überprüft.