Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrakt

Mehrdimensionale säulenchromatographische Methode mit UV-Detektion zur Bestimmung von Propranolol in therapeutischen Konzentrationen in menschlichem Plasma

Kamal A. al-Sagar und Malcolm R. Smyth

Eine einfache und schnelle HPLC-Testmethode zur Bestimmung von Propranolol (InderalR) in menschlichem Plasma wurde entwickelt und validiert. Die Methode macht das Extraktionsverfahren vollständig überflüssig; die Probenreinigung erfolgte durch Online-Festphasenextraktion. Die Trennung erfolgte mit einer μBondapack 10 μm C18-Säule (Octadecylsilan, 30 cm × 3,9 mm). Die mobile Phase bestand aus einer Mischung aus Wasser, Methanol, Acetonitril, Essigsäure und Triethylamin im Verhältnis 160 ml: 80 ml: 70 ml: 2,5 ml: 125 μl. Der pH-Wert wurde vor der Zugabe von Triethylamin mit 1 N NaOH auf 3,4 eingestellt. Die mobile Phase wurde gefiltert (0,2 μm-Filter) und in einem Ultraschallbad entgast. Die Flussrate der mobilen Phase betrug 0,5 ml/min. Die Detektion erfolgte durch einen UV-Detektor bei 291 nm und die Retentionszeit (RT) wurde mit etwa 8 Minuten beobachtet. Die Wiederfindung des Arzneimittels aus dem Plasma wurde durch Vergleich der Spitzenhöhe der extrahierten Plasmaproben mit der Spitzenhöhe authentischer (nicht extrahierter) Standards ermittelt, die bei diesen Konzentrationsniveaus direkt (d. h. ohne Säulenwechsel) in die analytische Säule injiziert wurden. Die Wiederfindungswerte zeigten Unterschiede von weniger als 4,0 % zwischen der zugegebenen Menge und der ermittelten Menge und waren unabhängig von der Konzentration. Die Reaktion war in einem Bereich von 20 bis 100 ng/ml linear mit einer Nachweisgrenze von 1 ng/ml und einer Bestimmungsgrenze von 8 ng/ml Plasma. Diese Bestimmungsgrenze ist für klinische Analysen und pharmakotherapeutische Studien angemessen und mit den von anderen Forschern ermittelten Werten vergleichbar. Dieselbe Methode wurde für die Bioverfügbarkeitsstudie der Propranolol-Formulierung an gesunden, menschlichen und männlichen Freiwilligen verwendet.