Abstrakt

Durch TPA induzierte Monozyten/Makrophagen - ähnliche Zelldifferenzierung in HL60 Zellen führt zum Verlust der Histon H4 Lysin 16 Acetylierung

Rahul Kumar Vempati

12-O-Tetradecanoylphorbol-13-acetat (TPA) ist ein Phorbolester und induziert eine monozyten-/makrophagenähnliche Zelldifferenzierung in HL60-Zellen. Die Ebenen und Muster der Genexpression unterscheiden sich stark zwischen differenzierten und undifferenzierten HL60-Zellen. Epigenetische Histonmodifikationen spielen eine entscheidende Rolle bei der Transkriptionsaktivierung und Veränderungen der Modifikationsebenen beeinflussen das Genexpressionsmuster stark. Die Acetylierung von Histon H4 Lysin 16 (H4K16ac) ist eine solche Modifikation und spielt eine bedeutende Rolle bei der Transkriptionsaktivierung. Veränderungen des Acetylierungsniveaus, sei es aufgrund einer physiologischen oder pathologischen Wirkung, haben dramatische Auswirkungen auf die zelluläre Genexpression. Hier wurde eine Studie durchgeführt, um die Wirkung der durch TPA induzierten Differenzierung auf die H4K16ac-Ebenen in HL60-Zellen zu untersuchen. Ergebnisse aus der Durchflusszytometrie zeigten die Expression des Makrophagen-Zelloberflächenmarkers CD11b auf TPA-differenzierten HL60-Zellen und die Western Blots zeigten eine drastische Herunterregulierung von H4K16ac in differenzierten Zellen. Immunoblotting und Co-Immunpräzipitationstest zeigten eine DNA-Schaden-abhängige Verstärkung der H4K16-Acetylierung und ihre Co-Lokalisierung mit γH2AX in undifferenzierten Zellen. TPA-differenzierte Zellen (CD11B+ve) zeigten hingegen keine derartige Verstärkung der H4K16-Acetylierungsniveaus in Gegenwart von DNA-Schaden. Die vorliegende Studie zeigt, dass die TPA-induzierte Differenzierung von HL60-Zellen in Makrophagen zur Herunterregulierung der H4K16-Acetylierung führt.

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