Zeitschrift für mikrobielle und biochemische Technologie

Abstrakt

In-situ-Überwachung der Lysozymkonformation während der durch „Nanotemplate“ induzierten Kristallisation mittels Raman-Spektroskopie

Claudio Nicolini, Luca Belmonte, George Maksimov, Nadezda Brazhe und Eugenia Pechkova

Mithilfe von Raman-Spektroskopie und Lysozym, letzterem als Modellprotein, untersuchen wir die Unterschiede in der Proteinkonformation vor und nach der durch LB-Nanotemplates induzierten Kristallkeimbildung und dem Wachstum. Wir fanden heraus, dass der Hauptunterschied in der Lysozymkonformation mit der höheren Anzahl von SS-Bindungen im Lysozym von LB-Kristallen zusammenhängt, wahrscheinlich am C-Ende des Proteins, was zu einer höheren Steifheit der Lysozymmoleküle und des LB-Kristalls insgesamt führt. Das Größenwachstum des LB-Kristalls im Laufe der Zeit geht auch mit der Bildung von SS-Bindungen einher. Die durch Röntgenbeugung ermittelte Atomstruktur korreliert mit den Ergebnissen der Raman-Spektroskopie und bestätigt, dass die Hauptunterschiede zwischen LB- und klassischen Kristallen in der Umgebung der Wassermoleküle liegen, die zuvor mit der erhöhten Strahlungsstabilität von LB-Kristallen in Verbindung gebracht wurde.