Zeitschrift für Bakteriologie und Parasitologie

Abstrakt

Identifizierung der verursachenden Spezies bei Patienten mit kutaner Leishmaniose mittels PCR-RFLP

Eroglu F, Koltas IS und Genc A

Kutane Leishmaniose (CL) ist in Cukurova im Süden der Türkei ein Problem der öffentlichen Gesundheit. Wir untersuchten die Effizienz einer PCR-Methode bei der Diagnose von CL. Wir verwendeten zwei verschiedene Ziele: Kinetoplast-DNA (kDNA) zur Diagnose und ein Mini-Exon-Gen zur Arttypisierung. 64 Abstrichproben wurden von klinisch auf CL hinweisenden Fällen entnommen. Die DNA wurde mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit universellen Primern 13A-13B, die spezifisch für die Gattung Leishmania sind, zu Kinetoplast-DNA (kDNA) amplifiziert und die DNA wurde im Mini-Exon-Bereich mittels PCR mit Fme-Rme-Primern, die spezifisch für Leishmania-Arten sind, amplifiziert. Wir verglichen die Sensitivität und Spezifität konventioneller Mikroskopie mit kDNA- und Mini-Exon-PCR. Die kDNA-PCR hatte eine Spezifität von 58,8 % bzw. eine Sensitivität von 100 %. Darüber hinaus führten wir eine Restriktionsfragmentlängenpolymorphismus-Analyse (RFLP) an den PCR-Produkten des Mini-Exons zur Genotypisierung von Leishmania-Arten durch. Interessanterweise zeigte das PCR-RFLP-Ergebnis, dass 31,5 % der Isolate Leishmania infantum (L.infantum) in CL-Fällen ohne viszerale Leishmaniose (VL) in der Vorgeschichte aufwiesen.