Biochemie und analytische Biochemie

Abstrakt

HPLC-UV/FD-Methoden für Scopoletin und Asiatische Säure: Entwicklung, Validierung und Anwendung in von der WHO empfohlenen Stabilitätstests für pflanzliche Arzneimittel

Nancy Yogita Bansal und Gulshan Bansal

Eine von der WHO empfohlene beschleunigte Stabilitätsstudie wurde an im Handel erhältlichen Kräuterprodukten, die Shankhpushpi zusammen mit Bacopa monnieri (A) oder Centella asiatica (B) enthielten, sechs Monate lang bei einer Temperatur von 40 ± 2 °C und 75 ± 5 % relativer Luftfeuchtigkeit durchgeführt. Kontrollproben jedes Produkts wurden bei 4 °C gelagert. Stabilitätsproben wurden nach 1, 3 und 6 Monaten entnommen. Jede Kontroll- und Stabilitätsprobe wurde mittels HPLC-Methoden auf ihren Gehalt an Scopoletin, Asiatsäure und Bacosid A untersucht, da sich solche Methoden als selektiver, empfindlicher, effizienter, reproduzierbarer und genauer als spektroskopische und chemische Methoden erweisen. Im Vergleich zu anderen Methoden wie GSC und GLC bieten diese Methoden auch Vorteile bei der Probenhandhabung, Kosteneffizienz und Vielseitigkeit bei der Analyse chemisch unterschiedlicher Verbindungen. Neue, für Scopoletin und Asiatsäure entwickelte und validierte Methoden erwiesen sich für die Analyse von Scopoletin (1 – 500 ng/ml) und Asiatsäure (10 – 1.000 μg/ml) als ausreichend präzise, ​​genau und robust. Bacoside A wurde in keiner der Kontrollproben von Produkt A nachgewiesen, was darauf hindeutet, dass B. monnieri entweder in A fehlt oder der Gehalt an Bacoside A zu niedrig ist, um nachweisbar zu sein. Es wurde festgestellt, dass der Gehalt an Scopoletin und Asiatsäure zwischen verschiedenen Chargen und Produkten stark variiert (Scopoletin 165,78 – 206,15 ng/ml in A und 2,61 – 28,78 ng/ml in B, und Asiatsäure 30,14 – 44,92 μg/ml in B), was auf eine wahrscheinliche Variabilität der therapeutischen Wirksamkeit der Produkte hindeutet. Der Markergehalt nahm nach 6 Monaten Lagerung unter beschleunigten Bedingungen deutlich ab, was bedeutet, dass die therapeutische Wirksamkeit des Produkts mit der Lagerung ebenfalls erheblich abnehmen kann. Diese Ergebnisse legen außerdem Echtzeit-Stabilitätsstudien gemäß den WHO- und ICH-Richtlinien nahe, bei denen die Marker quantifiziert und die therapeutischen Wirkungen durch geeignete In-vitro-/In-vivo-Methoden bewertet werden, um die tatsächliche Haltbarkeit der Produkte festzustellen.