Zeitschrift für Bioäquivalenz und Bioverfügbarkeit

Abstrakt

Abschätzung des Hämolyseeffekts von Doxycyclinhyclat 150 mg Retardtabletten in der Bioanalyse (menschliches Plasma) mittels Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie

Paresh Mistry und Shobhna Menon

Eine schnelle, einfache und spezielle Methode zur Bestimmung von Doxycyclin im Plasma gesunder Menschen wurde mit Minocyclin als IS validiert. Der Analyt und IS wurden mittels SPE aus dem Plasma extrahiert. Die Verbindung wurde auf einer RP-Säule mit einer isokratischen mobilen Phase bestehend aus 0,1 % Ameisensäure in Wasser und Acetonitril (12:88, v/v) entfremdet und mittels Tandem-Massenspektrometrie im positiven Ionenmodus nachgewiesen. Die in mehreren Reaktionsüberwachungsmodi aufgezeichneten Ionenübergänge waren m/z 294,1→225,1 für Doxycyclin und m/z 286,1→217,1 für IS. Für Doxycyclin wurde im Konzentrationsbereich von 0,3–30 ng/ml Linearität im Plasma beobachtet. Die mittlere Wiederfindung für Doxycyclin betrug 83,7 %, mit einer unteren Bestimmungsgrenze von 0,3 ng/ml. Der Variationskoeffizient des Tests betrug weniger als 6,8 % und die Genauigkeit 96,1 % bis 102,2 %. Die validierte Methode wurde bei der Bioäquivalenzstudie einer 150 mg Doxycyclinhyclat-Tablette an gesunden menschlichen Freiwilligen angewendet. Die validierte Methode wurde verwendet, um Studienproben einer Bioäquivalenzstudie einer 150 mg Doxycyclinhyclat-Tablette mit verzögerter Wirkstofffreisetzung an 36 gesunden menschlichen Freiwilligen auszusetzen. Insgesamt wurden 50 Proben von einzelnen Freiwilligen als hämolysiert identifiziert, die zunächst analysiert und dann wiederholt wurden, um die Reproduzierbarkeit der Methode für den Hämolyseeffekt zu überprüfen und zu vergleichen, welche akzeptablen Bereiche gefunden wurden. Die Bioäquivalenz wurde für Tests und Referenzen unter Verwendung einer validierten Methode für experimentelle Proben nachgewiesen (Abbildung 1).