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Abstrakt

Erzeugung und Charakterisierung von IgY-Antikörpern aus mit Salmonella spp. immunisierten Lohmann-Braun-Hühnern für ihren späteren Einsatz in der Nanotherapie

Gordon G, Morán G, Ayala L, Seqqat R, Fernández R und Torres M

Salmonellose ist eine häufige Lebensmittelvergiftung, die durch das Bakterium Salmonella enterica verursacht wird. Diese Krankheit kommt häufig in Ecuador vor und wird durch Geflügel übertragen. Eine neue Alternative zur Eindämmung der Infektion bei Mensch und Tier ist die passive Immunität. Folglich können spezifische Antikörper als Therapeutika auf Basis von biologisch abbaubaren Nanopartikel-Liposomen entwickelt werden. Spezifische Antikörper werden produziert, indem Hühner mit spezifischen Antigenen geimpft und anschließend die im Eigelb angesammelten Antikörper gewonnen werden. Ziel dieser Arbeit war die Reinigung spezifischer IgY-Antikörper gegen Salmonella spp. aus Lohmann-Brown-Hühnern. Eine Gruppe von Hühnern wurde mit einem Pool aus Salmonella enterica subsp entérica Serovar Enteritidis und Salmonella enterica subsp entérica Serovar Infantis immunisiert. Diese beiden Bakterienpools wurden vorab durch eine Behandlung (T1) mit Formaldehyd bzw. eine Hitzebehandlung (T2) inaktiviert. Lipide wurden mit 0,1 % Pektin entfernt, das mit Ammoniumsulfat pelletierte Protein (35 % w/v) wurde in PB-Puffer 0,025 M pH 8 resuspendiert. Die Gesamt-IgY-Antikörper wurden mit DEAE-Zellulose gereinigt. Die höchste Ausbeute an Gesamt-IgY betrug 5,5 mg IgY/ml Eigelb nach der (T2)-Behandlung 63 Tage nach der Immunisierung. Die Charakterisierung wurde mit ELISA- und MABA-Techniken durchgeführt und die Immunreaktivität wurde per Western Blot in Gesamtantiseren und gereinigtem Protein ausgewertet, hybridisiert mit kommerziellen Anti-Hühnchen-Antikörpern von SIGMA. Die schwere Kette 67 kDa und die leichte Kette 25 kDa wurden visualisiert. Solche Antikörper könnten einen schnellen und sofortigen Schutz gegen mehrere Biotargets gewährleisten, das neue IgY hat Potenzial für eine Nanotherapie gegen Salmonellose-Erkrankungen.

Haftungsausschluss: Dieser Abstract wurde mit Hilfe von Künstlicher Intelligenz übersetzt und wurde noch nicht überprüft oder verifiziert.