Zeitschrift für Pflanzenpathologie und Mikrobiologie

Abstrakt

Gentransformation von Alfalfa-Pflanzen ( Medicago varia L.) der heimischen Sorte „Burgaltai“ zur Erhöhung der Blattgröße

Uuganzaya Myagmarjav*, Enkhchimeg Vanjildorj, Altantsetseg Khajidsuren

Die Luzerne-Sorte „Burgaltai“ ist das wichtigste Futter in der Mongolei und ihr Ertrag ist in den letzten Jahrzehnten aufgrund von Fremdbestäubung zurückgegangen. Diese Studie wurde durchgeführt, um die Blattgröße der Sorte „Burgaltai“ durch Agrobacterium -vermittelte genetische Transformation zu erhöhen, bei der das Gen des wachstumsregulierenden Faktors AtGRF2 von Arabidopsis thaliana übertragen wurde. Die In-vitro -Regeneration wurde aus sieben Tage alten Hypokotyl- und Keimblatt-Explantaten zur Kallusinduktion gewonnen. Induzierte Kalli wurden zur Sprossinduktion und -vermehrung verwendet. Vermehrte Sprosstriebe wurden in ein Wurzelinduktionsmedium übertragen. Das beste Medium zur Calli-Induktion war MSB5 (Murashige Skoogs Medium mit Gamborgs Vitamin), ergänzt mit 2 mg/l 2,4-D, 0,2 mg/l BAP und 1 mg/l NAA, das Sprossinduktions- und Proliferationsmedium aus Calli war MSB5-Medium, ergänzt mit 1 mg/l BAP, 0,1 mg/l NAA, proliferierte Sprosse wurzelten auf halbstarkem MSB5-Medium, ergänzt mit 0,5 mg/l NAA. Für die genetische Transformation wurden Hypokotyl-Explantate als Ausgangsquelle verwendet. Insgesamt wurden 235 Explantate auf Transformation getestet und 30 Explantate (12,7%) waren gegen Hygromycin-Antibiotika resistent und regenerierten Pflänzchen. Pflänzchen wurden in Erde umgesetzt und frische junge Blätter wurden zur Bestätigung für einen histochemischen GUS-Test und RT-PCR verwendet. Unter ihnen wurden sieben unabhängige transgene Pflänzchen (T6, 8, 11, 12, 13, 15, 22) bestätigt, die sich vollständig regeneriert haben. Die Blattgröße der transgenen Luzernesorte „Burgaltai“ war im Vergleich zum Wildtyp um 0,7 cm² größer ^. Die Linien T6 und 11 zeigten ein Segregationsverhältnis von 3:1 in den T1-Nachkommen (X2 = 0,04–0,42, p ≤ 0,52–0,84).