Zeitschrift für Pflanzenpathologie und Mikrobiologie

Abstrakt

Formulierung einer neuen Oberflächensterilisationsmethode und von Kulturmedien zur Isolierung endophytischer Actinomyceten aus Heilpflanzen und ihrer antibakteriellen Wirkung

Waheeda K und Shyam KV

Endophytische Actinomyceten aus Arzneipflanzen wurden im Vergleich zu solchen aus Boden- und Meeresquellen seltener gemeldet. Die vorliegenden Ergebnisse korrelieren das Vorhandensein von endophytischen Actinomyceten in Arzneipflanzen, indem diese aus drei Arzneipflanzen isoliert wurden, nämlich Ocimum basillicum, Withania somnifera und Rauvolfia tetraphylla. In der vorliegenden Arbeit wurden Methode und Medium zur Oberflächensterilisation standardisiert und 32 endophytische Actinomyceten aus drei Arzneipflanzen isoliert. Wir untersuchten die Effizienz von vier verschiedenen Methoden zur Oberflächensterilisation und vier Medien zur Isolierung von endophytischen Actinomyceten. Die verwendete Methode mit Calciumhypochlorit, Natriumhydrogencarbonat und Natriumazid (neue Methode) war bei der Eliminierung epiphytischer Mikroorganismen wirksamer. Unter den vier getesteten Medien erwies sich Stärkekasein-Agar (SCA) als das beste Medium zur Isolierung von endophytischen Actinomyceten. Es ist uns gelungen, ein schnelles und üppiges Wachstum einer Reinkultur endophytischer Actinomyceten auf modifiziertem ISP-4 (M) (Agar mit anorganischer Salzlösung) im Vergleich zu Standard-ISP-4 (S) zu erreichen. Die vorläufige antibakterielle Wirkung aller Isolate wurde durch Konfrontationstest getestet. Das sekundäre Screening ausgewählter Isolate wurde durch einen Scheibendiffusionstest unter Verwendung von Ethylacetatextrakt getestet, der eine antibakterielle Breitbandaktivität gegen getestete menschliche Pathogene zeigte. Auf Grundlage der morphologischen und phänotypischen Merkmale wurden 12 Isolate als Streptomyces spp. identifiziert. Unter den 12 Isolaten wurde A3 als Vertreter durch SEM charakterisiert und durch 16SrRNA-Analyse als Streptomyces flavoviridis A3WK identifiziert; es zeigte eine signifikante antibakterielle Wirkung gegen getestete menschliche Pathogene. Dies ist der erste Bericht über die erfolgreiche Isolierung endophytischer Actinomyceten aus den genannten Arzneipflanzen unter Verwendung einer neu entwickelten Oberflächensterilisationsmethode und einer neuen Vergleichsstudie auf ISP-4-Medium.