Pharmaceutica Analytica Acta

Abstrakt

Entwicklung und Validierung einer stabilitätsanzeigenden Hochdruckflüssigkeitschromatographiemethode zur Bestimmung von Prostaglandin E1 und seinen Abbauprodukten in intrakavernösen Formulierungen

Victoire Vieillard, Ghorbel N, Deffaux C, Astier A, Yiou R und Paul M

Um das Versagen der Standardbehandlungen bei erektiler Dysfunktion nach radikaler Prostatektomie zu überwinden, wurde eine neue intrakavernöse Formulierung entwickelt. Diese Formulierung enthält 15 μg/ml Prostaglandin E1 (pGE1) in Verbindung mit 15 mg/ml Papaverin und 2,5 mg/ml Urapidil. Da pGE1 die Hauptverbindung war, die einem physikochemischen Abbau unterlag, korrelieren sein Abbau und das damit einhergehende Auftreten seines Abbauprodukts Prostaglandin A1 (pGA1) mit der Stabilität der Formulierung. Die geringe spezifische Absorption von PGE1 im Ultraviolettbereich und das Vorhandensein hoher Konzentrationen von Papaverin und Urapidil in der Formulierung waren die Hauptschwierigkeiten bei der Entwicklung einer neuen Methode zur gleichzeitigen Bestimmung von pGE1 und pGA1. Viele Zusammensetzungen und pH-Werte der mobilen Phase wurden untersucht, um die besten chromatographischen Bedingungen zu finden, und die gewählte Methode ist eine empfindliche, präzise und genaue Ramp-Reversed-Phase-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (RP-HPLC). Die Ramp-RP-HPLC-Trennung wurde auf einer Kromasil-5-C18-Säule (250 × 4,6 mm Innendurchmesser, 5 μm Partikelgröße) unter Verwendung einer mobilen Phase aus Acetonitril-pH-3-Phosphatpuffer (37 : 63 %, v/v) durchgeführt. Die Detektion wurde bei 205 und 230 nm für PGE1 bzw. pGA1 unter Verwendung eines Mehrwellen-UV-Detektors durchgeführt. Die Methode wurde auf Spezifität, Linearität, Präzision, Richtigkeit, Robustheit und Sensibilität validiert. Die Bestimmungsgrenzen lagen bei etwa 3 μg/ml für pGE1 und 0,5 μg/ml für pGA1. Das Vorhandensein von Urapidil und Papaverin in hohen Konzentrationen störte die Bestimmung von pGE1 und pGA1 in der Formulierung nicht. Die entwickelte Methode, die alle unter verschiedenen Bedingungen gebildeten Abbauprodukte trennt, war empfindlich, selektiv, linear, präzise und genau und kann daher zur Untersuchung der Stabilität der Formulierung verwendet werden.