Zeitschrift für Bioäquivalenz und Bioverfügbarkeit

Abstrakt

Entwicklung und Validierung einer HPLC-UV-Methode zur Prüfung der Auflösung von Ciclosporin: Ihre Anwendung zur Messung von Marken- und Generikaversionen aus verschiedenen Ländern

Badr Aljohani, Faisal Alotaibi F, Essam Ghazaly, Jaber Al Jaber, David Perrett und Atholl Johnston

Ciclosporin wird als Immunsuppressivum nach Organtransplantationen eingesetzt. In letzter Zeit wurden viele Fragen zur Verwendung generischer Ersatzstoffe aufgeworfen, insbesondere bei Arzneimitteln mit enger therapeutischer Breite (NTIDs). In dieser Studie wurde eine einfache Methode der Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) entwickelt, validiert und auf den Nachweis von Ciclosporin in Freisetzungstests angewendet. In diese Studie wurden sieben Ciclosporinprodukte (Gelatinekapseln) einbezogen, die aus Kolumbien (C), Ägypten (E), Indien (I), Jordanien (J), Pakistan (P), Saudi-Arabien (S) und der Türkei (T) bezogen wurden. Der Freisetzungstest wurde mit allen Kapseln durchgeführt. Die Bedingungen waren wie folgt: 500 ml deionisiertes Wasser als Medium in Gerät 2 (Pharmatest, Deutschland), Temperatur 37,5 ± 0,5°C; 50 U/min, Probenahmezeiten waren 5, 10, 15, 30, 60 und 90 min mit 5 ml für jede Probe. Die HPLC-Trennung erfolgte über eine C18-Säule, 5 μm (4,6 × 250 mm, ACE 5), die bei 50 ± 0,3 °C gehalten wurde. Die Analyten wurden während der Laufzeit von 25 Minuten isokratisch mit 0,7 ml/min mit Acetonitril und Wasser (70 + 30 %) und 0,03 % Trifluoressigsäure eluiert. Die Intra- und Inter-Day-Ungenauigkeit für Ciclosporin über den Standardbereich betrug <5 % bzw. <4 %. Die Genauigkeit des Tests lag bei Standardkurvenkonzentrationen von 0,1 bis 2 mg/ml Ciclosporin innerhalb von ± 13 % des tatsächlichen Werts. Die untere und obere Nachweisgrenze lagen bei 0,001 mg/ml bzw. 2 mg/ml Ciclosporin. Alle Marken (S, T, P, J, E) und ein Generikum (C) zeigten nach 90 Minuten jeweils über 80 % Ciclosporin (90,3, 100, 90,4, 82,7, 81,4 und 90,6 %). Ein Generikum (I) zeigte weniger als den Mindestprozentsatz der angegebenen Menge, 69,1 %. Im Vergleich zur Marke (T) zeigte die statistische Analyse signifikante Unterschiede (P < 0,0001) des durchschnittlichen Prozentgehalts zwischen Marke und Generikum. Der Bereich des 95 %-Vertrauensintervalls für die Marken (E, J, P und S) betrug (72,2–91,8), (73,4–93,3), (80,2–101,9) bzw. (80,1–101,8) und (80,3–102,1) bzw. (61,3–77,9) für das Generikum (C) und (I). Aufgrund dieser Ergebnisse kommen wir zu dem Schluss, dass einige der Ciclosporin-Präparate nicht die exakt angegebene Masse enthalten und dass die Mehrheit bisher nicht identifizierte Verunreinigungen enthält.