Vu Quang Huy, Tran Thien Trung, Ha Manh Tuan, Vu Chi Thanh, Le Van Chuong, Nguyen Lam Duc Vu, Huynh Thi Diem Phuc, Bui Quang Sang
Ziel: Aufbau eines Verfahrens zur Probenherstellung für die spezifische Serodiagnose von Antikörpern gegen Fasciola gigantica über ein externes Qualitätsbewertungsschema sowie Bewertung der Homogenität und Stabilität der Untersuchungsproben.
Methoden: In dieser experimentellen Studie wurden Proben gesammelt, die einen Antikörper gegen Fasciola gigantica enthielten , der durch ELISA-Screening und anschließende Bestätigung durch Western Blotting ermittelt wurde. Alle Proben wurden getestet und waren negativ auf andere Helminthen, insbesondere auf Trematoden-Antikörper. Die Proben waren auch negativ auf Antikörper gegen HIV-1 und -2, Antikörper gegen HCV und HBs-Antigen. Die Proben wurden durch Gefriertrocknung und Gefrierverfahren hergestellt, die Stabilität und Homogenität wurden alle 2, 4, 8, 12 und bis zu 24 Wochen bewertet.
Ergebnisse: Wir haben drei Chargen Serumproben hergestellt, die Antikörper gegen Fasciola gigantica in drei Konzentrationen enthielten. Charge DK1 hatte eine optische Dichte von OD = 0,350 ± 0,037; Charge DK3 und DL3 hatten O = 0,653 ± 0,046 und Charge DL1 hatte OD = 0,850 ± 0,047 bei einer Wellenlänge von 450 nm. Die spezifischen IgG-Antikörper gegen Fasciola gigantica -Antigene erwiesen sich mit der Western-Blot-Technik als positiv für alle drei Proteine, 8–9 kDa-Protein (P 8–9), 28 kDa (P 28) und 42 kDa (P 42). Die Homogenität der Probeproben wurde durch den Fisher-Test (F-Statistik 0,05) bestätigt und ihre Stabilität über 24 Wochen (mit t-Statistik 0,05) bestätigt.
Schlussfolgerung: Durch Gefriertrocknung und Einfrierverfahren können Probeproben für die spezifische Serodiagnose von Anti- Fasciola gigantica -Antikörpern mittels externer Qualitätssicherung mit einer Homogenität und Stabilität von 24 Wochen hergestellt werden.