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Abstrakt
Bestimmung von IPTG in rekombinantem menschlichem Wachstumshormon mittels Ionenchromatographie und gepulster elektrochemischer Detektion
Wang Li, Lin Birong
Es wurde eine neuartige Methode zur Bestimmung von Isopropyl-β-D-thiogalactopyranosid (IPTG) entwickelt, einer schwefelhaltigen Verbindung, einem pharmazeutischen Zusatzstoff in handelsüblichem rekombinantem menschlichem Wachstumshormon (rhGH). Sie verwendet eine gepulste elektrochemische Detektion (PED) nach ionenchromatographischer Trennung. Zum Einsatz kam ein Dionex-500-Ionenchromatograph mit gekoppeltem elektrochemischem Detektor, ausgestattet mit einer Arbeitselektrode aus Gold und einer analytischen Acclaim 300 C18-Säule mit einer mobilen Phase bestehend aus Natriumacetat (NaOAc)-Puffer (pH 5,45, 0,01 mol/l) und Acetonitril (ACN) (90/10, v/v). Nach Optimierung stellte sich heraus, dass IPTG eine Nachweisgrenze von 1 ng/ml (0,1 μmol) bei 25 μl Injektionsvolumen aufweist. Diese Methode wurde erfolgreich zur Bestimmung von IPTG in rhGH-Proben eingesetzt und zeichnet sich durch Einfachheit, hohe Empfindlichkeit und gute Wiederholbarkeit aus.