Zeitschrift für Bioäquivalenz und Bioverfügbarkeit

Abstrakt

Bestimmung von Aprepitant in menschlichem Plasma mittels LC-MS/MS mit Elektrospray-Ionisation

Ravi Prakash PVDLS, Sumadhuri B und Srikanth M

Es wurde eine präzise, ​​empfindliche und durchsatzstarke Methode mittels Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS) zur Bestimmung von Aprepitant (APT) in menschlichem Plasma entwickelt und validiert, wobei Quetiapin (QTP) als innerer Standard verwendet wurde. Der Analyt und der innere Standard wurden mittels Flüssig-Flüssig-Extraktion aus menschlichem Plasma extrahiert. Die chromatographische Trennung erfolgte auf einer Discovery C18-Säule (10 cm × 4,6 mm, 5 μm) mit einer isokratischen mobilen Phase aus 5 mM Ammoniumacetat (pH 4,00):Acetonitril (10:90) bei einem Fluss von 0,9 ml/min. Die MS-MS-Erkennung erfolgte auf einem AB Sciex API 3200 Tandem-Massenspektrometer, das im Mehrfachreaktionsmonitoring (MRM) im positiven Modus bei m/z 535,10/277,10 und 384,00/253,10 für APT bzw. QTP betrieben wurde. Ein linearer dynamischer Bereich von 10,004–5001,952 ng/ml für APT wurde mit einem mittleren Korrelationskoeffizienten (r) von 0,9991 ausgewertet. Die Präzision des Tests (ausgedrückt als Variationskoeffizient, CV) betrug weniger als 15 % bei Konzentrationen von LQC, MQC, HQC und weniger als 20 % für LLOQQC. Die prozentualen Wiederfindungsraten für APT bei Kontrollproben mit hoher, mittlerer und niedriger Qualität betrugen 71,9 %, 68,0 % bzw. 63,8 % und für den internen Standard 77,7 %. Der Analyt erwies sich während fünf Gefrier-Auftau-Zyklen sowie Labor-, Nassextrakt-, Trockenextrakt-, Autosampler- und Zwischenstabilitätsstudien als stabil. Daher wurde festgestellt, dass die vorgeschlagene Methode für die routinemäßige Qualitätskontrollanalyse von Aprepitant in menschlichem Plasma in Bioäquivalenzstudien geeignet ist.