Zeitschrift für klinische und experimentelle Pharmakologie

Abstrakt

BTF3-Promoter-basiertes Screening von Wirkstoffen gegen Brustkrebs

Kavita Rawat, Wahajul Haq, Raj Kamal Tripathi*

Der Basistranskriptionsfaktor 3 (BTF3) ist ein Transkriptionsfaktor, der bekanntermaßen in verschiedenen Krebsarten unterschiedlich exprimiert wird; bei Magenkrebs induzierte die Stilllegung von BTF3 Apoptose. Zuvor berichteten wir, dass das menschliche β-Caseinfragment 54-59 (NS) die BTF3-Expression in menschlichen THP-1-Zellen herunterreguliert. In der vorliegenden Studie entwickelten wir ein In-vitro-Modell, das auf den BTF3-Promotor abzielt, um Verbindungen zu screenen, die BTF3 herunterregulieren, und um die Auswirkungen der BTF3-Herunterregulierung auf die Apoptose in der MCF-7-Zelllinie zu untersuchen. Wir bestätigten die Wirksamkeit von NS zur Herunterregulierung von BTF3 in MCF-7-Zellen zusätzlich durch Western Blotting. NS und seine Analoga AN1, AN2 und AN3 wurden während der vorübergehenden Transfektion in der MCF-7-Zelllinie auf dem BTF3-Promotor-Reporter-Konstrukt gescreent, wobei die Expression des Reporters nach der Behandlung herunterreguliert wurde. Diese Studie wurde zusätzlich durch Immunoblotting bestätigt, das ähnliche Ergebnisse in MCF-7-Zellen lieferte. Um die biologische Funktion der Unterdrückung der BTF3-Expression durch NS und Analoga zu bestimmen, wurden Zelllebensfähigkeitstests und Annexin-V-FITC-Färbungen durchgeführt. Die Ergebnisse zeigten deutlich eine Zunahme der Apoptose bei der Herunterregulierung von BTF3 in MCF-7-Zellen. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die BTF3-Expression ein entscheidender Biomarker in der Brustkrebstherapie ist und unser Modell ein Vorteil für das schnelle Screening von Verbindungen sein kann, die die BTF3-Expression in verschiedenen Krebsarten modulieren, bei denen eine Überexpression festgestellt wurde.