Biochemie und analytische Biochemie

Abstrakt

Entwicklung und Validierung analytischer Methoden zur Bestimmung des Gehalts der antibakteriellen Arzneimittel Besifloxacinhydrochlorid und Phenoxyethanol in Gelformulierung

Pradeep Kumar, Neelam Pawar*, Neha Minocha, Kavita Bahmani, Asha Poonia

Ziel: Das Ziel der vorliegenden Arbeit ist die Entwicklung und Validierung einer Analysemethode zur Bestimmung des Gehalts einer antibakteriellen Dug-in-Gel-Formulierung.

Hintergrund: Bei der Validierung analytischer Methoden handelt es sich um einen Prozess, der Bestätigungsstudien umfasst, dass das Verfahren/die Methode/das System/der Analytiker präzise und reproduzierbare Ergebnisse liefert, die durch Laborstudien bestätigt werden und bei denen die Leistungsmerkmale der Technik den für die analytischen Anwendungen erforderlichen Anforderungen entsprechen.

Ziel: Verbesserung der Bedingungen und Parameter, die bei der Entwicklung und Validierung beachtet werden sollten, durch Entwicklung einer neuen empfindlichen und genauen RP-HPLC-Methode. Validierung der vorgeschlagenen neu entwickelten Methoden in Übereinstimmung mit den in den IP-, USP-, BP- und ICH-Richtlinien genannten analytischen Parametern.

Methoden: Die HPLC-Methode wurde validiert, um anhand verschiedener Parameter wie Spezifität, Linearität, LOD, LOQ, Präzision, Genauigkeit, Bereich, Robustheit, Stabilität in der analytischen Lösung und Systemeignung nachzuweisen, dass das verwendete analytische Verfahren für den beabsichtigten Gebrauch geeignet ist.

Ergebnisse: Die Retentionszeiten für das Medikament Besifloxacin betrugen 7,781 min für den Standard und 7,731 min für die Probe. Die Fläche von Standard-Besifloxacin betrug 1828547 und die Probenfläche 1825315. Die Analyse der Probe betrug 98 %. Die Retentionszeiten für das Medikament Phenoxyethanol betrugen 2,010 min für den Standard und 2,004 min für die Probe. Die Fläche von Standard-Phenoxyethanol betrug 438025 und die Probenfläche 438103. Die Analyse der Probe betrug 97,04 %. In Bezug auf die Systemeignung beträgt die RSD für 5 wiederholte Injektionen für jeden Peak 0,33 %. In Bezug auf die Spezifität stören Peaks von Verdünnungsmittel, Placebo und Verunreinigungen die Besifloxacin-Peaks nicht. Die Peaks von Besifloxacin erwiesen sich als rein. Es wurde festgestellt, dass Abbauprodukte gut vom Besifloxacin-Peak getrennt waren. Der Peak-Reinheitsfaktor war NLT 0,9995. In der Präzisionsstudie betrug die Systempräzision RSD der Retentionszeit für Besifloxacin, die aus sechs wiederholten Injektionen erhalten wurde, 0,33 %. Die RSD der Besifloxacin-Fläche, die aus sechs wiederholten Injektionen erhalten wurde, beträgt 0,46 %. Die Methodenpräzision RSD wurde anhand von 6 Bestimmungen berechnet; der Analysewert des Arzneimittels Besifloxacin beträgt 0,56 %. Die anhand von 6 Bestimmungen berechnete RSD für den Analysewert des Arzneimittels Besifloxacin beträgt 0,50 %. Bei der Zwischenpräzision wurde die RSD anhand von 6 Bestimmungen berechnet; der Analysewert des Arzneimittels Besifloxacin beträgt 0,50 %. Die anhand von 12 Bestimmungen (Methodenpräzision und Zwischenpräzision) berechnete RSD für den Analysewert beträgt 0,50 %. Stabilität in der analytischen Lösung für Standard und Probe, der Flächenunterschied des Besifloxacin-Peaks lag innerhalb von ± 2,0 % der anfänglichen Linearität. Der Korrelationskoeffizient und der Regressionskoeffizient (R-Quadrat) dürfen für Besifloxacin nicht weniger als 0,995 betragen. Der Korrelationskoeffizient beträgt 0,998. Der Regressionskoeffizient beträgt 1,000. Der %-Achsenabschnitt sollte innerhalb von ± 5,0 % der Antwort auf dem 100-%-Niveau liegen. Präzision auf dem 50-%- und 150-%-Niveau: Die RSD beträgt 0,01 %. Präzision auf dem 50-%- und 200-%-Niveau: Die RSD beträgt NMT 2,0 %. Die Genauigkeit der mittleren %-Wiederherstellung auf jedem Niveau liegt zwischen 98 und 101 % des Arzneimittels Besifloxacin. Die RSD bei 9 (3 Niveaus x 3) Bestimmungen beträgt 1,2 Für die Genauigkeits- und Linearitätsparameter wurde eine Korrelation von 1,0 % festgestellt.

Schlussfolgerung: Die Rückgewinnung liegt zwischen 98 % und 101 % und der RSD-Prozentwert für alle Rückgewinnungswerte beträgt 1,41 %, was im Grenzbereich liegt. Bei der HPLC-Methode wurden die Bedingungen optimiert, um eine ausreichende Trennung der eluierten Verbindungen zu erreichen.