Biochemie und analytische Biochemie

Abstrakt

Allosterische Struktur von effektorfreiem menschlichem Hämoglobin

Franziska Knowles

Die O ₂ -Affinität von menschlichem Hämoglobin, frei von E-Molekülen, wurde in 0,050 M Bis-Tris, pH 7,0 mit HCl, 20 °C gemessen. Ein Hill-Diagramm der O ₂ -Gleichgewichtsbindungsdaten zeigt eine anfängliche Steigung von 2 und kann keine Aufwärtsbiegung aufweisen. Vier O ₂ -Bindungsreaktionen sind für diese Ergebnisse verantwortlich. Die tetramere Hämoglobinstruktur in einem E-freien Leitelektrolyten kann als zwei kooperative dimere Untereinheiten beschrieben werden: ( ^T,1 α, ^R,2 β) und ( ^T,2 α, ^R,1 β). Untereinheiten von menschlichem Hb ₄ sind α- und β-Ketten. Innerhalb des Hämoglobintetramers: (i) beschreiben eingeklammerte Einschlüsse die Zusammensetzung der kooperativen dimeren Untereinheiten; (ii) hochgestellte Ziffern oben links identifizieren die Position der Untereinheit im Tetramer und den Konformationszustand; R für den Zustand hoher Affinität und T für den Zustand niedriger Affinität. Die Gleichgewichtskonstanten dieser vier Schritte hängen über statistische Faktoren mit den intrinsischen O ₂ -Bindungskonstanten für α- und β-Ketten, K _α bzw. K _β , zusammen: Die Zustandsgleichung enthält diese vier unbekannten Größen.