Einzelzellbiologie

Abstrakt

Akzentuierte molekulare Detektionstechnik zur Trennung und Identifizierung von Fischhelminthen durch hochauflösende Schmelzanalyse (HRM)

Neeshma Jaiswal, Rashmi Tripathi und Sandeep K Malhotra

Es wurde eine Echtzeit-PCR in Verbindung mit einer hochauflösenden molekularen Analyse (HRM) durchgeführt, um den zweiten internen transkribierten Spacer (ITS-2) der nuklearen ribosomalen DNA zu bestimmen. Letzterer diente als genetischer Marker zur Identifizierung und Unterscheidung von zwei Anisakiden- und einer Cucullanidenart, die Meeres- und Süßwasserfische parasitieren. Für jeden der drei untersuchten Spulwürmer wurden einzigartige und unterschiedliche Merkmale der HRM-Muster ermittelt. Die Schmelzprofile und Zyklenschwellenwerte (Ct-Werte), bei denen die Amplifikation begann, waren für Anisakis simplex (Rudolphi), Contrcaecum osculatum (Rudolphi) Dujardin, Contrcaecum sp. und Dacnitoides cotylophora (Ward und Magath) artdiagnostisch. Die molekularen Analysen durch Sequenzierung und Vergleich des internen transkribierten Spacers (ITS) der ribosomalen DNA von Dacnitoides-, Anisakis- und Contrcaecum-Assays ergaben ihre eindeutige Identität. Die vorliegende Untersuchung zielt auf die molekular-phylogenetische und morphomolekulare Analyse ab, um diagnostische Bestandteile von Spulwürmern der Gattung Cucullanidae und Anisakididae zu charakterisieren.