Gentechnologie

Abstrakt

Ein schneller Echtzeit-PCR-Test für CYP2C19-Genvarianten zur Optimierung des Einsatzes von Clopidogrel und anderen Thrombozytenaggregationshemmern bei PCI-Stent-Patienten

Khandrika L, Parsam V, Mahalingam M, Musmoori SG, Nandan U, Dange S, Sahoo PK, Rath PC und Jain J

Einleitung: Clopidogrel ist in Kombination mit Aspirin nach perkutaner Herzintervention (PCI) das am häufigsten verschriebene Thrombozytenaggregationshemmer-Medikament. Allerdings ist die Reaktion von Patienten auf Clopidogrel bekanntermaßen sehr unterschiedlich, da die Bioverfügbarkeit von der Umwandlung des Prodrugs in die pharmakologisch aktive Form von Clopidogrel abhängt. Diese Umwandlung hängt von der Aktivität mehrerer Leberenzyme der Cytochrom-P450-Familie ab, bei denen CYP2C19 eine zentrale Rolle spielt. Wichtige Mutationen in diesem Gen führen entweder zu einem Funktionsverlust oder einem Funktionsgewinn in CYP2C19, was letztlich zu einer Änderung der Thrombozytenreaktivität bei einer Person führt. Das Risiko wurde als so hoch eingeschätzt, dass die FDA dem Medikament einen „eingerahmten Warnhinweis“ hinzufügte, der medizinisches Fachpersonal ermahnt, die besten verfügbaren Informationen zu nutzen, um Patienten besser zu behandeln. Daher ist die Identifizierung des Genotyps einer Person vor der Einnahme von Clopidogrel notwendig, um dessen optimale Thrombozytenaggregationshemmungsaktivität zu erreichen. Methoden: Blutproben wurden von einwilligenden Patienten gesammelt, nachdem sie die Erhaltungsdosis der Thrombozytenaggregationshemmung erhalten hatten. Zur Identifizierung der spezifischen Mutationen im CYP2C19-Gen wurde ein neuartiger allelspezifischer Echtzeit-PCR-Test entwickelt. Die Echtzeit-PCR-Methode unter Verwendung von SYBR Green wurde gegenüber der zuvor beschriebenen herkömmlichen RFLP-Methode validiert und zur Bestimmung der Häufigkeit und Art von Mutationen in einer Population von Post-PCI-Patienten verwendet. Ergebnisse: Die Echtzeit-PCR-Methode war bei der Identifizierung der Varianten des CYP2C19-Gens schneller und kostengünstiger. Die neue Methode war mit der herkömmlichen RFLP-Methode vergleichbar. Die Ergebnisse der Studie weisen auf eine hohe Prävalenz von Mutationen hin, die die normale Funktion des CYP2C19-Gens bei der Mehrheit der indischen Bevölkerung verändern würden. Schlussfolgerungen: Aufgrund der hohen Mutationshäufigkeit bei indischen PCI-Patienten kommen wir zu dem Schluss, dass eine Genotypisierungsvariante von CYP2C19 eine hervorragende Möglichkeit zur Optimierung des Thrombozytenaggregationshemmungsregimes nach PCI bietet.