Zeitschrift für mikrobielle und biochemische Technologie

Abstrakt

Eine schnelle und effiziente Farbstoff-basierte Plattentesttechnik zum Screening von L-Asparaginase produzierenden Pilzstämmen

Vaishali P und Bhupendra NT

Das Enzym L-Asparaginase hat aufgrund seines Potenzials als Krebsmedikament und Wirkstoff in der Lebensmittelverarbeitung große Aufmerksamkeit erhalten. L-Asparaginase produzierende Mikroben werden üblicherweise auf Phenolrot-Platten gescreent, die L-Asparagin als einzige Stickstoffquelle für ihr Wachstum enthalten. Der Kontrast der Zone auf den Phenolrot-Platten ist jedoch nicht sehr deutlich. Zur Lösung dieses Problems ist eine alternative Methodologie für das Screening von Pilzstämmen erforderlich, die extrazelluläre L-Asparaginase produzieren. In der vorliegenden vergleichenden Untersuchung wird eine verbesserte Screening-Methode vorgestellt, bei der Alizarinrot S und 4-Nitrophenol als pH-Indikatoren dienen. Platten mit Alizarinrot S und 4-Nitrophenol sind bei saurem pH-Wert farblos und werden bei alkalischem pH-Wert rosa bzw. gelb. Somit bildet sich eine dunkelrosa und gelbe Zone um L-Asparaginase produzierende Mikrobenkolonien, die zwischen Enzymproduzenten und Nicht-Produzenten unterscheiden. Daher berichten wir, dass Alizarinrot S und 4-Nitrophenol die Produktion des Antikrebs-Enzyms bei einer viel niedrigeren Farbstoffkonzentration erkennen können, was genauer und charakteristischer zu sein scheint als die herkömmliche Methode zum Screening von Pilzen, die extrazelluläre L-Asparaginase produzieren.